生化实验蛋白质的变性凝固及沉淀反应性质.pptVIP

生化实验蛋白质的变性凝固及沉淀反应性质.ppt

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蛋白质的变性、凝固 及沉淀反应 生物化学与分子生物学教研室 实验一 实验目的和意义 验证关于蛋白质的相关理论 学会分析蛋白质的基本实验方法 讨论蛋白质分析在科研和临床工作中的意义 血清、尿液中蛋白质分析与疾病诊断   蛋白质的变性 在某些物理和化学因素作用下,蛋白质理化性质的改变和生物学活性的丧失。 基本概念   蛋白质的变性 现象 本质 一级结构不变 二硫键和非共价键被破坏   蛋白质的变性 引起蛋白质变性的理化因素 加热 乙醇等有机溶剂 强酸、强碱 重金属盐 生物碱试剂   蛋白质的变性 学习蛋白质变性的意义 利用 消灭病原微生物 蛋白质制剂的保存 保护体内蛋白质 避免 变性的可逆性 可逆变性:除去变性因素,蛋白质空间结构可以恢复原状。 不可逆变性:除去变性因素,蛋白质空间结构不能恢复原状。 一般轻度变性是可逆,过度变性是不可逆。   蛋白质的变性   蛋白质的沉淀 破坏蛋白质的水化层和电荷,使蛋白质从溶液中析出的现象 基本概念 蛋白质沉淀是一种现象 维持蛋白溶液稳定的因素: 疏水领域 颗粒表面水化膜 胶粒表面同种电荷   蛋白质的沉淀 可逆沉淀 不可逆沉淀 结构和性质都不变 适当条件下可重新溶解 是分离和纯化的基本方法 结构和性质都发生变化 沉淀不再溶解于水   蛋白质的沉淀与变性 变性蛋白易于沉淀 沉淀蛋白不一定变性   蛋白质的凝固 接近于等电点附近的蛋白质溶液加热,可使蛋白质发生凝固 基本概念 不可逆变性状态   蛋白质的凝固 临床应用实例 水/无机盐/尿素 水/无机盐/尿素/蛋白质 蛋白质变性凝固 加热醋酸法

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