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DNA的粗提取与鉴定; 构成生物体的遗传物质是什么?; 构成生物体的遗传物质是什么?;基础知识;提取DNA的方法;2. DNA的溶解性
DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反。; ①根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图,思考在什么浓度下,DNA的溶解度最小? DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的?; ①根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图,思考在什么浓度下,DNA的溶解度最小? DNA在NaCl???液中的溶解度是如何变化的?; ②如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?; ②如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?;3. DNA在酒精溶液中的溶解性
DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离。;4. DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性;4. DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性;4. DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性;4. DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性;5. DNA的鉴定;5. DNA的鉴定;5. DNA的鉴定; 通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以从细胞中提取和提纯DNA;再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分离开来,达到提纯的目的;最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。;(一)实验材料的选取;(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液;讨论;讨论;①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜;讨论;讨论;①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜;讨论;讨论;(三)去除滤液中的杂质;(三)去除滤液中的杂质;(三)去除滤液中的杂质; 得用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。
具体做法是:在滤液中加入NaCl,使NaCl溶液浓度为2mol\L,过滤除去不溶的杂质,再调节NaCl溶液浓度为0.14mol/L,析出DNA,过滤去除溶液中的杂质,再用2mol/L溶液溶解DNA。;讨论;讨论;方案二 ;讨论;讨论;(四) DNA的析出与鉴定;(四) DNA的析出与鉴定;2. DNA的析鉴定;3. 实验操作;DNA析出…………加蒸馏水至0.14mol/L,过滤,在溶解到2mol/L溶液中;操作提示;1、以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠,防止血液凝固。
2、加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作。加入酒精和玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
3、二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果。;课题延伸
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