（全国卷 地区专用）2018高考生物总复习 第十三单元 现代生物科技专题 第1讲 基因工程.pptVIP

* * * * * 知识突破 真题感悟 考向突破 必记必辨通关 考点一 考点二 考点三 2．(2016新课标Ⅰ，40)某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH Ⅰ酶切后，与用BamH Ⅰ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题。 (1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有_______________________________________________________(答出两点即可)。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。 能自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点 知识突破 真题感悟 考向突破 必记必辨通关 考点一 考点二 考点三 (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是________________________________________________________________；并且____________ 和______________________________________________的细胞也是不能区分的，其原因是__________________________________ ____________________在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有_______的固体培养基。 四环素 二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长 含有质粒载体 含有插入了目的基因的重组质粒(或含有重组质粒) 二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在 该培养基上均能生长 知识突破 真题感悟 考向突破 必记必辨通关 考点一 考点二 考点三 3．(2016新课标Ⅲ，40)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。 根据基因工程的有关知识，回答下列问题。 (1)经BamHⅠ酶切得到的目的基因可以与上述表达载体被____________酶切后的产物连接，理由是________________________________________________________________。 Sau3A Ⅰ 两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端 知识突破 真题感悟 考向突破 必记必辨通关 考点一 考点二 考点三 (2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有________________，不能表达的原因是_____________________________________________________________________________________________。 (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有______________和______________，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是______________________。 T4DNA连接酶 甲和丙 甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游，两者目的基因均不能转录 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 【解析】(1)由于限制酶Sau3AⅠ与BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同，所以经BamHⅠ酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被Sau3AⅠ酶切后的产物连接。(2)在基因表达载体中，启动子应位于目的基因的首端，终止子应位于目的基因的尾端，这样目的基因才能表达。图中甲、丙均不符合，所以不能表达目的基因的产物。(3)常见的DNA连接酶有E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是T4DNA连接酶。 知识突破 真题感悟 考向突破 必记必辨通关 考点一 考点二 考点三 4．(2015新课标Ⅰ，40)HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。回答下列问题。 (1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时，可先提取HIV中的________，以其作为模板，在________的作用下合成______________，获取该目的蛋白的