输血和体液检验实验指导.ppt

分类器使用！！（左手） Bas Eos Nsg（中指） Lym（指食） Nst Mon 采血示教！！ 血涂片显微镜检查 1. 检查内容 （1）血涂片制备及染色情况：全片，Lp （2）寄生虫检查： （3）WBC数量估计、形态观察及DC： （4）RBC数量估计及形态： （5）PLT数量估计及形态观察 2. 检查程序 （1）肉眼观察：血涂片制备情况 （2）显微镜准备 （3）放片：血片体尾交界部位放在视野中央 （4）LP检查：血涂片制备及染色；寄生虫等 （5）油镜检查：WBC、RBC、PLT；其他 外周血中正常WBC形态 P33 Mon形态 一、RBC计数 1. 方法及原理 2. 器材 显微镜、计数板、微量吸管等 3. 试剂及标本 NS 4. 操作程序 （1）采血、取血、稀释、充池： 深 20ul + 0.38ml稀释液；10μl + 2mlNS 推片 （2）计数：中央大方格内5个中方格（HP） （3）计算：RBC/L= N/5×25×10×200×106/L = N/100×1012/L （4）报告：RBC = X.X × 1012/L 实验五 RBC计数和PLT计数 5.注意事项 （1）稀释液：等渗、稀释、过滤 （2）混匀：充分（方法） （3）充池：均匀，2次RBC数量＜5%（RV内） （4）WBC过多（＞100×109/L）：校正 二、PLT计数 1. 方法 2.原理 3.器材 4. 试剂及标本 N 4. 操作程序 （1）采血：RBC时一起取血 （2）取血、稀释： 20 ul + 0.38ml （3）混匀、静置：混匀1min ，放置待RBC基本破坏 （4）充池：混匀，充池、静置10-15min， （2）计数：中央大方格内5个中方格（HP） （3）计算： （4）报告：PLT= XXX × 109/L 5.注意事项 体积小 易黏附 聚集 破坏 （1）器材、试剂干净：稀释液需过滤，器材干净，防 止微粒和细菌污染。 （2）采血：进行末梢采血时，针刺3mm，血流通畅。第 一滴血弃去，首先采血作PLT计数。操作迅速，防 止粘附、聚集和破坏。 （3）混匀：血液加入稀释液内充分混匀防止PLT粘附 和聚集，充池前也需充分混匀，但注意混匀力度 防止破坏血小板或产生气泡。 （4）静置：充池后需静置10～15min，使PLT充分下 沉。 （4）计数：计数光线稍暗，应与小RBC、细胞碎 片、杂质、灰尘及微生物的区别。 （5）时间：在1h 内计数完毕。 （6）温度：室温高时注意保持计数池周围的湿 度，以免水分蒸发而影响计数结果。 实验报告 一、RBC计数操作程序及结果报告 二、PLT计数操作程序及结果报告 三、PLP计数关键环节注意事项 实验六 Hb测定 实验报告 一、Hb测定操作程序（讲完课后写） 1. 方法及原理 2. 器材 3. 试剂及标本 伊红-丙酮 4. 操作程序 （1）准备: 取小试管2支，0.38ml Eos 稀释液； Ret染液 1滴 （2）取血、稀释：20ul + 0.38ml；1滴血于染色中 （3）充池计数：充分混匀、充池2个计数池， 共10个大方格（Lp）。30min内计数完 （5）计算： Eos=N/10×10×20×106 =N/50×109 /L （6）报告：Eos = 0.XX × 109 / L 实验七 嗜酸性粒细胞计数 5.注意事项 （1）1hr内计数（30min内），破坏，难辨认。 （2）立即混匀（易聚集），但稀释后不应过分 振摇；稀释液粘稠可适当延长混匀时间。 （3）注意与残留NC区别：不着色或着色浅，颗 粒小。 实 验 七 Eos计数 1.操作程序及结果报告 2.各环节注意事项 1.原理 2. 器材 缩小视野纸片 3.试剂 10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液 4.操作（试管法） 1）加染液：小试管1支，加染液1滴。 2）采血、取血：加血1滴于试管中，混匀。 4）染色和制片：室温下放置15～20min后，制片 5）计数：油镜至少检查1000个RBC中Ret数 凡RBC含2个以上深染颗粒即为Ret 6）计算及报告