改良法大鼠肝星状细胞的分离培养及鉴定-中国科技论文在线.PDF

____________________________________________________________________________ 北 京 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) JOURNAL OF PEKIN G UNIVERSITY( HEAL TH SCIENCES) 　Vol. 33 　No. 1 　Feb. 2001 ·83 · 改良法大鼠肝星状细胞的分离培养及鉴定 翁山耕 ,冷希圣 ,魏玉华 ,彭吉润 ,郑恩涛 ,程继华 ,张佑彬 , 吕建锋,杜如昱 (北京大学人民医院外科 ,北京 　100044) [ 关键词] 肝星状细胞 ;细胞 ,培养的 ;肝硬化/ 病因学 ( ) [摘 　要] 目的:改良大鼠肝星状细胞 hepatic stellate cells ,HSC 的分离培养及鉴定方法 ,使之简便易行 ,高效可靠。 方法 :采用肝离体胶原酶灌注消化 ,低速离心去除肝细胞 ,密度梯度离心法分离 HSC ,采用台盼蓝染色排斥法鉴定 细胞活率 ,desmin 加 GFAP 免疫细胞化学双染色法鉴定 HSC 纯度。结果 :采用改良法 ,每只大鼠的 HSC 得率为 ( ) 7 ( ) ( ) 7 2. 54 ±0. 13 ×10 个 ,细胞活率为 98. 8 ±0. 7 % ,高于旧方法的 HSC 得率[ 2. 18 ±0. 18 ×10 个 , P 0. 01 ] 和 ( ) ( ) 活率 94. 3 ±0. 6 % , P 0. 01 ] 。用 desmin 加 GFAP 免疫细胞化学双染色法鉴定 , HSC 纯度为 96. 8 ±1. 0 % ,高 ( ) ( ) 于单用 desmin 鉴定的纯度 91. 8 ±2. 2 % P 0. 01 。结论 :改良的大鼠 HSC 分离培养方法简便易行又经济 ,在 保证纯度的同时 ,提高了得率和活率。采用 desmin 加 GFAP 免疫细胞化学双染色法鉴定细胞纯度 ,提高了鉴定的 敏感性。 ( ) [ 中图分类号] R575. 2332 　　[文献标识码] B 　　[文章编号] 2001 An improved method of isolating and identif ying rat hepatic stellate cells WEN G ShanGeng , L EN G XiSheng , WEI YuHua , PEN G JiRun , ZHEN G EnTao ,