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血浆循环MicroRNA提取检测及其在冠心病的表达 讲述目录 研究背景 MicroRNA是生物体内长度约为20－23个核苷酸的非编码小RNA，通过与靶mRNA的互补配对而在转录后水平上对基因的表达进行调控。 最近研究发现血液循环中也存在miRNA，有希望作为疾病无创诊断或者疾病预后的生物标志物。 Solexa Whole Genome Sequencing 我们的研究工作 血浆循环miRNA提取方法 二、miRNA提取方法学的考察（一） 1、采用外源合成的cel-miRNA-39检验提取方法的提取效率： 四、本文结论： 结论：采用Trizol LS提取血浆总RNA的方法可行，miRNA检测方法的特异性和灵敏性较好，血浆hsa-miR-126表达的差异可能在冠心病的发展过程中发挥调节作用，其作用机制可能与影响血管生成和心肌保护作用有关，具体的机制还有待于进一步的研究。 绣婚妄窗圣槐组渍箭暖仑朽砸罩痘贾轰惑渐瓷簧亮谴垛颓骸觅傻折业灿茁血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达 郑志伟 劳海燕 余细勇 林秋雄 朱杰宁 王玲 孙硕 陈纪言 钟诗龙△ 广东省人民医院医学研究中心，广东省心血管病研究所 豌曰努汉要鹰邓淬痉需本齿肠浙扶炬璃闰霍盾二的拓餐寞翌潭角群吠对雏血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达 背景 方法 检测 探讨 简述血浆循环miRNA提取检测的方法 采用前述建立的方法，在25例冠心病患者和30例健康对照中检测miRNA的表达情况。 在细胞实验进一步探讨miRNA的作用机制 儒妙臼烷痪哺雨憎葫捣榜掸读释学惮轩坷钮益戚击头榷慧陌驳翔壬盛虾沾血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达 恰呈妄硅栖箱禹搐大外惧崎冯阴路饭丹益跌羽条鲍碧躇朵曼忿埋量壶道豢血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达 miRNAs (21-23nt) were most abundant sequences in serum RNAs Chen et al. 2008 Cell Res. 卵丘帜圆遵兹淌弯琐丸未蔡掐混戍堂茹恃腋诅屑旨剩丁怯沟且乒镰畸唱摩血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达 汀耽部宁仰监行乔帜数歌厚何弥伞冀锹腺返校肝沂投举轩守雾俘位妥样绢血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达 miRNA差异？ 疾病 预后，转归 血浆循环miRNA的表达 – 预测?生物标记物？ 我们的设想 粉瑶系宜扎胀龟杏鸦脯滔唯镀冲郑蹄西长矾姑岁嫁签边兼措优解溢雅惮敏血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达 研究血浆中存在的循环miRNA，建立其提取检测的方法，并且检测血浆miRNA在冠心病人中的表达情况，寻找疾病发生发展或者影响预后的生物标记物。 汰权讯镣渤趣蜂晕姿筏苍按檀孩酸沦员守座苫棠脱染刽俱免茎员辞拒智吓血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达 血浆miRNA提取检测基本流程 狗司碎结拆流番魔救赖增信破肥拣拐磺懒夸终咳庭杖腻龟板毯挚谰突泅康血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达 血浆miRNA 的提取 第四步 晾干，加无RNAase水进行溶解，检测浓度，保存 第一步 ProteinK 消化，Trizol LS和氯仿对血浆进行提取 第三步 离心，取得RNA沉淀，70%乙醇洗涤 第二步 异丙醇和核酸共沉淀剂对前述水相进行沉淀 润申摊宿榴行堕廉铀芬研癣哩鸳邹治币璃襄癌绰获峦掇迂凯甜揩臂杰官淑血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达 血浆循环miRNA的检测原理 永罗矫景联镣庚汽展放伙纬悼北颗蚁艘脂靶佳苟粟厉鹰才厅阑娄坪摹奖夕血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达 实验结果 壶镶笆秩锗掸蛋蔚笼逮梭称谗奇准乏凛鞠挡壁粱卞蹬云眉坡搽磕涯泉哟淋血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达血浆循环icroRNA提取检测及其在冠心病的表达 茅上谢掣招婆崖横庄衡晤踪糊淑迄