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血培养标本采集及处理的规范化操作 上海医学院附属中山医院检验科 李 龙 感染形势严峻 感染性疾病并没有像人类曾经预料的那样随着抗感染化疗时代的到来而销声匿迹。多种原因造成的易感人群增加； 多重耐药菌如甲氧西林耐药的金葡菌（MRSA）、产ESBL的肺炎克雷伯菌和大肠杆菌、泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌等不断涌现并持续蔓延，曲霉菌、念珠菌等深部真菌越来越常见； 新发感染病原如SARS、禽流感、手足口病、甲型H1N1流感等也此起彼伏，感染性疾病仍然是人类关注的热点。 临床微生物学的任务 WHO对临床微生物实验室提出三项指导性方针 （1）临床微生物实验室尽可能把目标集中在快速诊断方面； （2）显微镜检查对建立快速的初步诊断具有很大价值； （3）实验室人员必须主动与临床结合，将实验室数据转化为临床有用的信息。 标本采集和处理的原则 发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查 最好是病程早期、急性期或症状典型时，而且必须在使用抗生素或其他抗菌药物之前采集 标本采集时应严格无菌操作，采集的标本应无外源性污染，减少或避免机体正常菌群及其它杂菌污染 采集的标本均应盛于无菌容器内 要收集足够量的标本 标本采集后应立即送至细菌室 重视无菌部位的标本：血培养 分析当前血培养存在的问题： 报告不及时 阳性率低 采样时污染 培养一次（单部位）作为诊断依据 采血量不够（与培养基比例不正确） 采样时间不正确 血液培养操作规范 采集血培养的重要指征 1. 发热（≥38℃）或低温（≤36℃）。2． 寒战。3． 白细胞增多（10×109/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多)。4． 粒细胞减少（成熟的多核白细胞1×109/L）。5． 血小板减少。6． 皮肤粘膜出血。7． 昏迷。8． 多器官衰竭，血压降低，CRP 升高及呼吸快，或同时具备上述几种体征而临床可疑菌血症应采血培养。 新生儿菌血症，应增加尿液和脑脊液培养。 对入院危重感染患者未进行系统性抗菌药物治疗之前，应及时采集血培养。 血培养检测消毒程序 皮肤消毒程序 为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂对皮肤进行严格仔细的消毒处理，最大限度地减低皮肤污染。 用70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。 然后用棉签（1~2%碘酊或10%碘伏）消毒皮肤，从穿刺点向外以1.5~2cm直径画圈进行消毒。 最后用70%酒精脱碘。对碘过敏的患者，只能用70%酒精消毒，消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。 不允许在消毒后按压静脉，除非带有无菌手套。 培养瓶消毒程序 1． 用70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞，作用60s。 2． 用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面剩余的酒精，然后注入血液。 皮肤消毒和污染的预防 碘酊、次氯酸和洗必泰的消毒效果要好于碘伏 碘酊和洗必泰的消毒效果大致相当 碘酊作用30秒； 碘伏作用1.5~2分钟； 洗必泰的作用时间和碘酊一样，但是由于没有伴随的过敏反应，所以不必擦去，但不能被用于小于2个月的婴儿皮肤消毒。 血培养检测采集和运送 采血量 婴幼儿和儿童，一般静脉采血1?5ml，采血量不超过患者总血量的1％；成人采血量是8?10ml，20?30ml最合适，血液和肉汤的比一般为1︰5至1︰10。 血培养的份数和采血时间 ◇一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单次血培养。 ◇建议常规的血培养应包括一个需氧血培养瓶和一个厌氧血培养瓶。 ◇对间歇性菌血症，用于培养的血液应在估计寒战或体温高峰到来之前0.5?1h采集，或于寒战或发烧后1h进行。 儿童血培养 不同于成人血培养，由于厌氧菌感染极少发生在儿童病人，因此建议只采用需氧瓶。厌氧培养只考虑针对特殊的高危群体。 皮肤消毒参照成人的方法，除新生儿以外。 儿童的采血量为不超过总血容量的1%。 样本拒收标准 标签错误或在血培养瓶上未贴标签 破损的或渗漏的血培养瓶 血液凝固的血培养瓶 含有抗凝剂（除了SPS)的血培养瓶 血培养检测结果的报告程序 培养48h后，对阴性血培养结果在最短的时间内发出初步（中间）报告。 血培养阳性，立即进行革兰染色。染色结果口头报告（电话通知）给患者的主治医生。 CLIS推荐的抗生素敏感试验没有血培养直接敏感试验法，但根据革兰染色可以灵活地选择抗生素进行直接抗生素药敏试验，供临床参考使用。 紧急口头报告 任何血培养的检测结果都会对患者的治疗造成重要的影响 初步的实验室结果（无论是涂片或培养），只要证明为血培养阳性，就必须认为是紧急状况马上向临床进行口头报告和沟通 紧急口头报告一定要在最短时间内报告（60分钟之内） 口头报告记录包含以下内容： 报告必须有报告者的全名 和临床负责医生联系报告的时间（无论成功或不成功） 所