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流式微球联合检测炎症性因子 IL-6、TNF-α和MCP-1方法学的建立和评价 令狐颖1 张程2 陈艳2 黄山基金项目：贵阳市科技局社会发展领域科技攻关项目[2010]筑科农合同字第1-社-35号和贵州省卫生厅立项资助项目[Gzwlj2009-1-007] 基金项目：贵阳市科技局社会发展领域科技攻关项目[2010]筑科农合同字第1-社-35号和贵州省卫生厅立项资助项目[Gzwlj2009-1-007]。 *通讯作者。 （1.贵州省人民医院临床检验中心，贵州贵阳 550002；2.贵阳医学院09级硕士研究生；3.本院心内科） 【摘要】 目的 建立流式微球分析技术联合检测人血清中细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和单核细胞趋化因子-1（MCP-1）的方法并对其进行系统性评价。方法 分别将三种选择好一定浓度的捕获抗体（IL-6、TNF-α和MCP-1鼠抗人单克隆抗体）包被在三种已激活的不同荧光强度编码的羧基化聚苯乙烯微球上，用正交试验对试验条件进行优化选择，并应用CLSI的有关规则进行方法学评价。结果 实验选择各种捕获单克隆抗体的加入量为10μg，各种生物素标记的羊抗人单克隆抗体的稀释倍数为1:540，第一次反应时间为2h、洗涤二次，PE标记亲和素的稀释倍数为1:1000，第二次反应1h洗涤一次。方法学评价显色： IL-6线性范围是1.13—3333.33