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1 2 基因工程的操作工具 1.基因的剪刀 ——限制性内切酶 2.基因的针线 ——DNA连接酶 3.基因的运输工具 ——运载体 基因工程的操作步骤 1.目的基因的提取 2.目的基因与运载体结合 3.目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与表达 基因工程(gene engineering)的原理 你见过树会走路吗? * * * * * * * * 第6章 从杂交育种到基因工程第2节 基因工程及其应用 人教版必修2 学习目标 1、简述基因工程的基本原理 2、举例说出基因工程在农业、医药等领域的应用 能发光的水母 能否能否让热带鱼也能发光? 设想 不能发光的热带斑马鱼 能产生人胰岛素的大肠杆菌 如何获得? 1、什么叫基因工程? 2、基因工程 的基本操作步骤有哪些? 3、归纳出科学家实施基因工程 的总体思路 阅读教材 P102,解决以下问题: 又称基因拼接技术,或重组DNA 技术。 通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向的改造生物的遗传性状。 一、基因工程 1.原理: 2.操作水平: 3.结果: 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。 基因工程 培育转基因大肠杆菌的简要过程: 你认为上述培育转基因大肠杆菌的关键步骤有哪些? 普通大肠杆菌 (不能分泌胰岛素) 人体组织细胞 提取 胰岛素基因 与运载体DNA拼接 导入 大肠杆菌(含胰岛素基因) 转基因大肠杆菌 (能分泌胰岛素) 培育转基因大肠杆菌的关键步骤: NO1. 胰岛素基因从人体细胞内提取出来 NO2. 胰岛素基因与运载体DNA连接 NO3. 胰岛素基因导入受体(大肠杆菌)细胞 基因的“剪刀” 基因的“针线” 基因的运载体 1.基因的剪刀—限制性内切酶 分布:主要在微生物中。 特点:专一性和特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点。 结果:产生黏性未端(碱基互补配对)。 举例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切割点上将DNA 分子切断。目前已发现的限制酶有200多种。 基因工程操作的工具 限制性内切酶(EcoRⅠ)作用过程 点击播放 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 练习使用EcoRI 剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 2.分子针线—DNA连接酶 连接酶的作用:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。 ? 基因进行了切割以后就有了切口, 怎样才能将有切口的基因与其他基因缝合在一起呢? 使用DNA连接酶制作重组DNA分子 甲片段 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 乙片段 GGCATCTTAA AATTCCGTAG 重组DNA分子 GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因(如人的胰岛素基因)怎样才能导入受体细胞(如大肠杆菌细胞)? 3.基因的运输工具——运载体 常用的运载体(carrying)有两类: (1)细菌细胞质的质粒( plasmid) (2)噬菌体(bacteriophages)或某些动植物病毒 (virus) 大肠杆菌的质粒 (plasmid): 运载体(carrying)应该具有什么特点呢? 作为运载体的条件 1、能够在宿主细胞内复制并稳定保存; 2、具有多个限制酶切点以便与外源基因 相连; 3、具有标记基因,便于进行筛选。 基因工程的“四步曲” 提取目的基因 1 目的基因与运载体结合 2 将目的基因导入受体细胞 3 目的基因的检测和表达 4 * * * * * * * *
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