叶绿体色素提取分离.pptVIP

实验二 叶绿体色素提取、分离及理化性质鉴定 高等植物叶绿体色素的种类 叶绿素（chlorophyll） 类胡萝卜素（carotenoid） 一、实验目的： 了解并掌握叶绿体色素的提取、分离的原理和方法；了解叶绿体色素的理化性质；了解叶绿体色素的光学特性在光合作用中的意义 二、原理 三、器材与试剂 1、仪器：漏斗、大试管、钵体、烧杯、滤纸、盖玻片、酒精灯 2、试剂：乙醇、CaCO3、石英砂、CCl4、盐酸、醋酸铜、KOH、苯 3、材料：菠菜叶片 四、方法 叶绿体色素的提取 取菠菜叶子10g，剪碎，加石英砂和碳酸钙少许，乙醇约5ml，研磨成匀浆，再加乙醇15ml，用漏斗过滤，即为色素提取液。 （1）纸层析法分离叶绿体色素 取准备好的滤纸条（2×15cm）,将其一端剪去两侧。用盖玻片蘸取叶绿体色素提取液, 于滤纸的下端窄条的上方中央。然后将滤纸条放入盛有CCl4的烧杯中。（注意：色素线不要浸到液面以下！实验完毕回收CCl4 ） 胡萝卜素 叶黄素 叶绿素a 叶绿素b 荧光现象 叶绿素溶液在透射光下呈绿色，在反射光下呈红色，称为荧光现象 。 （2）叶绿素的荧光现象 取上述色素乙醇提取液少许于试管中，在反射光和透射光下观察色素提取液的颜色有什么不同。反射光下观察到的溶液颜色 ，即为叶绿素产生的荧光现象。 光 e 第一单线态 第一三线态 体系间跨越 基态 荧光 磷光 （3）铜在叶绿素分子中的替代作用 取上述色素乙醇提取液少许于试管中，1滴1滴地加入盐酸，直至溶液出现褐绿色。然后加醋酸铜晶体2-3小粒，慢慢地在酒精灯上加热溶液，使溶液又产生亮绿色。 去镁叶绿素 铜代叶绿素 （4）黄色素和绿色素的分离 将叶绿体色素的提取液4毫升于大试管中，加入1毫升KOH-甲醇溶液，充分摇匀，然后加5毫升苯，摇匀，再沿试管壁慢慢加入1～1.5ml蒸馏水，轻轻混匀（勿激烈摇荡），观察分层现象。 类胡萝卜素（黄色素） 叶绿素（绿色素） 五、实验报告 列出并解释实验现象。