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*/20 液相分析中样品溶剂的选择 */20 目 录 溶剂效应的概念 含有离子对试剂实验中的溶剂效应 梯度洗脱方法中的溶剂效应 抗生素与甲硝唑实验中的溶剂效应 */20 什么是溶剂效应？ 溶剂效应的现象 色谱图上较早洗脱的峰前沿或者开叉，与此同时较晚洗脱的峰则较为正常，这些现象可能是有以下原因引起的——样品溶液的溶剂很可能强于流动相。 可能发生溶剂效应的情况 出峰时间早 保留弱 进样量大 溶剂效应 样品溶液的溶剂强度强于流动相溶剂强度时可能会造成的峰展宽、峰分叉现象。 */20 离子对方法中的溶剂效应 */20 0 5 10 15 20 5 mL 10 mL 20 mL 30 mL 40 mL 50 mL 75 mL 100 mL [ min ] 硫胺 吡哆醇 核黄素 样品溶剂 : CH3CN/H2O=10/90 1 2 */20 0 5 10 15 20 [ min ] 5 mL 10 mL 20 mL 30 mL 40 mL 50 mL 75 mL 100 mL 吡哆醇 硫胺 核黄素 样品溶剂 : 流动相 1 2 */20 使用10%乙腈作为样品溶剂时，随着进样量的增加，保留较弱的吡哆醇和硫胺出现裂峰 使用含有离子对试剂的流动相作为样品溶剂时，则不会发生上述现象。 结论 */20 CAPCELL PAK C18 MG, 2.0 mm i.d. X 150 mm, 40 ℃ H2O, CH3OH, 0-100% 梯度分析, 200 mL/min 杀虫剂的标准混合物质(10 μg/mL) 用甲醇溶解, Injection vol. 10 mL Leading 梯度洗脱时的溶剂效应 */20 结论 出峰早的峰受溶剂效应影响发生前沿 解决方案: ①降低进样量； ②使用初始有机相进行样品溶解 */20 抗生素甲硝唑分析中的溶剂效应 实验背景：我们按照2007版化妆品卫生规范中抗生素与甲硝唑的方法进行分析，在实验中发现溶剂效应。 */20 化妆品中抗生素与甲硝唑的分析 1、盐酸美满霉素（M.W.493.9）Minocycline hydrochloride 2、甲硝唑（M.W.171.15） Metronidazole 3、二水土霉素（M.W.496.46） Oxytetracycline dihydrate 4、盐酸四环素（M.W.480.9）Tetracycline hydrochloride 5、盐酸金霉素（M.W.515.34）Chlortetracycline hydrochloride 6、盐酸多西环素（M.W.480.9） Doxycycline hydrochloride 7、氯霉素（M.W.323.13） Chloramphenicol */20 07版卫生规范实验条件 实验方法介绍 甲醇+0.1mol/L盐酸=1+1 色谱柱：C18 250mm*4.6mm I.D.，5μm； 检测器：二极管阵列检测器，检测波长268nm； 流动相：0.01mol/L草酸溶液（磷酸调节水溶液的pH至2.0）+甲醇+乙腈=67+11+22（HPLC分析前，经0.45μm滤膜过滤及真空脱气）； 流 量：0.8mL/min； 柱 温：室温。 样品溶剂 */20 MG混标结果：按照07版化妆品卫生规范的样品提取溶液（甲醇+0.1mol/L盐酸=1:1 ）溶解 基线抬高，影响定量 07版化妆品卫生规范方法 */20 MG空白结果 由于出现未知的基线抬升，为确定是何原因引起的，分别对空白溶剂和各个单标进行分析 MG单标1结果 MG单标2结果 各单标及空白均无杂峰 */20 通过混标与单标对比，发现每个单标均无杂峰； 单标1、2在混合进样后峰高降低了（实际样品量同为1ug）； 因此确定1、2号峰中间的物质为1、2号标准品在卫生规范溶剂中相互作用的结果。 1 2 3 4 */20 样品溶解方法：取单标1、2各100μL混合用卫生规范溶剂定溶至1mL结果 不同溶剂下单标1、2混合物的出峰行为 样品溶解方法：取单标1、2各250μL混合用流动相定溶至1mL结果 样品溶解方法：取单标1、2各100μL混合用流动相定溶至1mL结果 随着样品溶剂中流动相比例增大会逐渐消除单标1和2之间的相互作用 */20 MG流动相溶解标准品结果 用流动相溶解标准物质 1和2之间基线未抬升 HPLC Conditions ： 色谱柱：CAPCELL PAK C18 MG 250mm*4.6mm I.D.，5μm； 检测器：二极管阵列检测器，检测波长268nm； 流动相：0.01mol/L草酸溶液（磷酸调节水溶液的pH至2.0）+甲醇、乙腈=74+26（HPLC分析前，经0.45μm滤膜过滤及真空脱气）； 流