核酸结构和功能演示文稿.ppt

* (肝) (小肠) Gln 终止信号 (7)引导RNA(guide RNA,gRNA) 引导RNA编辑的RNA分子, 编辑时,形成一个编辑体, 以gRNA内部的序列作为模板， 进行转录物的校正, 同时产生编辑的mRNA。 * 五、RNA组学 * 研究细胞内的全部RNA基因 DNA — 携带遗传信息的分子 蛋白质 — 执行生物学功能的分子 RNA — 既是信息分子,又是功能分子 RNA组学： * 研究RNA的分子结构与功能 * 从整体水平阐明RNA的生物学意义 转录 翻译 DNA RNA 蛋白质 * 第三节　核酸的理化性质 --- 核酸的变性、复性和杂交 1. 变性(denaturation) 理化因素导致核酸双螺旋等空间构象 破坏解体,但其一级结构仍完整的现象 * 理化因素: 加热、酸碱、尿素、甲酰胺 * 11 核酸变性现象观察： A260nm吸收 碱基暴露 紫外吸收 (共轭双键暴露) * 机制： 因分子内氢键破坏，2条核苷酸链解开， 原来重叠在分子内部的碱基暴露，导致 DNA(碱基)对紫外线吸收增加 ? 增色效应 核酸变性时其260nm吸收值升高现象 * 解链曲线 (DNA熔化曲线) a. 明显高于37?C时, A260nm值仍恒定 b. A260nm值在6-8?C变化之间快速上升 c. A260nm值变化和DNA结构改变的关系 * 上升前 — 完全双螺旋 * 上升区域 — 碱基对断裂 * 平坦区域前 — 仅少量碱基对连接 * 熔解温度（melting temperature, Tm） b. Tm一般在85-95?C DNA热变性时，其260nm吸收值 a. 不同生物DNA的Tm不同(G·C) 达最大值一半时的温度 * a. G·C含量： G·C增加1%, Tm增加0.40C b. DNA溶液中离子强度： 图3-25 接近0.2M时,屏蔽作用产生 Tm 影响Tm因素: * * 非稳定性的因素： 生理条件下，碱性蛋白和Na+中和磷酸基团(-) 静电斥力 — 磷酸基团(-) * 2. 复性(renaturation) (退火，annealing) 定义：变性DNA 恢复双螺旋 * DNA复性过程: 1.分子随机碰撞 #2.碱基正确配对 3.双螺旋重新形成 #复性的限速步骤 处理 * 图 3-26 DNA热变性过程的两种冷却过程示意图 * * 影响DNA复性速度因素: a. DNA浓度: 浓度高,分子多,复性快 b. DNA片段大小: 片段大,运动慢,复性慢 c. 片段的复杂性： 碱基排列复杂， 不易正确配对,复性慢 * d. 复性温度： 低 错配 高 变性 合适温度 -- 约为600C（Tm - 250C） e. 合适离子强度: 0.4M (克服静电斥力) * 3. 杂交（hybridization） 不同来源，但具互补序列的核酸 分子按碱基配对原则杂合在一起 DNA-DNA DNA-RNA RNA-RNA 是分子生物学研究中常用技术之一 * 1. 假基因 2. 管家基因 3. 反义RNA 4. 校正tRNA和校正突变 6. 试述原核和真核生物mRNA的结构的不同点 5. 试述DNA双螺旋结构的特点 复习题： * 可变环 20 * ④ tRNA的种类及功能： 起始tRNA: 只识别翻译时的起始信号,结合于P位 延长tRNA: 绝大多数tRNA属这一类，先结合于A位再转P位 校正tRNA：能够校正mRNA中的有害突变 同工tRNA: 多种tRNA携带一种氨基酸 tRNA的其它功能： 逆转录病毒复制时的引物 对色氨酸操纵子的调控 是核酸内切酶I的抑制剂 * 基因突变 移码突变 错义突变 无义突变 5` GUA GCC CAC UGG 3` 5` GUA GCC UAC UGG 3` 5` GUA GCC UAC UGG 3` 5` GUA GCC UAC UGA 3` 组 酪 终止子 色 * 校正tRNA 移码校正tRNA 错义校正tRNA 无义校正tRNA 5` GGG 3` 5` GGGG 3` 3` CCC 5` 3` CCCC 5` 甘 甘 5` GGA 3` 5` AGA 3` 精 甘 3` CCU 5` 甘 3` UCU 5` 甘 5` CAG 3` 5` UAG 3` 终止子 谷胺酰氨 3` GUC 5` 谷胺酰氨 3` AUC 5` 谷胺酰氨 * mRNA出现有害突变 校正tRNA反密码子改变 (携带的氨基酸不变) 突