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4、焙花青—铬钒法 将无水酒精与冰醋酸按体积比为3:1的比例混匀 ①卡诺氏固定液的配制方法 将5g铬明矾[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O]加入90ml蒸馏水中,溶解后加入0.1g焙花青,混匀并加热至沸腾,煮沸5分钟后冷却至室温,过滤,加蒸馏水定容至100ml。 ②焙花青—铬钒溶液的配制方法 点此播放教学视频 (二)材料的消毒 花蕾 (_______) 清洗 吸干水分 消毒2~4min 冲洗3~5次 浸泡约30s (______) (__________) (____________) (_______) 70%酒精 无菌吸水纸 无菌水 无菌水 1%氯化汞溶液 1%次氯酸钙溶液 饱和漂白粉溶液 1%氯化汞溶液 说明:用于培养的花药,实际上多数未熟,由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护,通常处于无菌状态,所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。 点此播放教学视频 月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较,二者有何不同? 在酒精消毒前,花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗 点此播放教学视频 (三)接种和培养 1 灭菌后花蕾,要在 下除去萼片和花瓣,并立即将花药接种到培养基上。 3 通常每瓶接种花药 ,温度控制在 左右, 。幼小植株形成后才 。 2 在剥离花药时,要尽量 (否则接种后,容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织),同时还要彻底 ,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。 一般经过20-30天培养后,会发现花药开裂,长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上,以便进一步分化出再生植株。 4 进一步鉴定和筛选:常常会出现染色体倍性的变化 无菌条件 不损伤花药 去除花丝 7-10个 25℃ 不需要光照 需要光照 主要原因是花粉管核和生殖核融合造成的 点此播放教学视频 注意:如果花药开裂释放出胚状体,则一个花药内就会产生大量幼小植株,必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开,分别移植到新的培养基上,否则这些植株将很难分开。 点此播放教学视频 在花药培养基中,用量最高的激素是_____ ;在诱导丛芽或胚状体培养基中,用量最高的激素是________________;在诱导生根的培养基中,用量最高的激素是______________ 。 BA (细胞分裂素) IAA(生长素) IAA (生长素) 点此播放教学视频 课题成果评价 一 选材是否恰当 二 无菌技术是否过关 三 接种是否成功 人工种子:胚状体 /顶芽 /不顶芽等+人工种皮+人工胚乳 课外知识 点此播放教学视频 植物组织培养技术与花药培养技术的异同点: 项目 相同点 不同点 植物组织培养技术 离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导出根,然后进行移栽。 外植体为体细胞,染色体数无需加倍。 花药培养技术 取材为花药,培养的为单倍体幼苗,植株弱小,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。 点此播放教学视频 点此播放教学视频 * * * * 月季的花药培养 知识回顾 单倍体育种的过程? 花药离体培养(N) 单倍体植株(N) 秋水仙素处理,使染色体翻倍 植株(2N) 特点:1 明显缩短育种年限 2 后代植株都为纯合子。 正常植株(2N) 1、被子植物定义:凡是种子有果皮包被着,胚珠有子房壁包被着的植物,就叫做被子植物 一、被子植物和裸子植物 2、裸子植物定义:凡是胚珠裸露,外面没有子房壁包被,种子外面没有果皮包被的植物称为裸子植物 实例:玉米、大豆、梨、杏 实例:松、杉、柏 点此播放教学视频 点此播放教学视频 被子植物的花的结构: 点此播放教学视频 花的作用 被子植物的有性生殖是在花里进行的,雌蕊和雄蕊是进行有性生殖的主要部分 二、被子植物花粉粒的形成 花丝 花药:囊状结构,内有很多花粉粒 1、雄蕊的结构 雄蕊: 点此播放教学视频 花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞 2、被子植物的花粉发育 ①经历时期: 四分体时期、单核期、双核期 点此播放教学视频 ②花粉粒的形成 花粉母细胞 (小孢子母细胞) 减数分裂 四分体
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