实验7植物的组织培养浙科版选修1.ppt

1.进行菊花的组织培养 2.尝试植物激素的应用 组织培养 营养繁殖 扦插 嫁接 压条 植物 无性繁殖方法 实验11 植物的组织培养 一、基础知识 1、组织培养： 取一部分植物组织，如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等，在无菌条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基上，给予一定的温度和光照，使之产生愈伤组织，或进而生根发芽。 2、植物组织培养的原理是什么？ 植物细胞具有全能性，即植物体的细胞，具有发育成为完整植物体的能力。 3、植物组织培养过程中通过什么手段可以诱导不同器官的生成？ 通过改变植物激素的配比(如细胞分裂素和生长素的比例) 细胞分裂素/生长素的比例高，诱导芽的生成。 发芽培养基: 细胞分裂素/生长素的比例中等，愈伤组织生长但不分化。 细胞分裂素/生长素的比例低，诱导根的分化。 生根培养基: 4.植物组织培养的基本过程: 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 烟草植株 取根细胞培养 形成愈伤组织 发育成幼胚 长成植 物幼体 成熟植株 消毒、灭菌处理 4.植物组织培养的基本过程: 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 5.植物组织培养条件: 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、合适的PH、适时光照、 一定浓度的激素配比等。 本实验使用的是人工合成的萘乙酸（生长素） 人工合成的苄基腺嘌呤（细胞分裂素） 二、菊花的组织培养 (一)设备及用品 1.100ml三角瓶或大口培养瓶 2.镊子 3.超净台 4.灭菌锅 5.封口膜和橡皮圈 6.有棉球的广口瓶 7.酒精灯 8.三角漏斗 9.培养皿 (二)材料 1.MS培养基(用于配置发芽和生根培养基) 2.萘乙酸用少量0.1mol/LNaOH溶液溶解,苄基腺嘌呤用少量0.1mol/LHCL溶解 3.发芽培养基(灭菌) 4.生根培养基(灭菌) (三)步骤 1.取外植体 超净台上将无菌培养的幼苗切段,每段至少1张叶片 2.生芽培养 生芽培养基中,放入1-3段切段，使一部分茎部插入培养基,盖上封口膜.日光灯下保持18~25℃的温度培养,每天光照不少于14.5h。 3.生根培养 2~3周后,将丛状苗在无菌条件下转入生根培养基中,在上述条件下继续培养. 4.适应锻炼 将苗转移至草炭土或蛭石中,用玻璃罩或塑料布保持80％以上的湿度,2~3天后打开减低湿度进行锻炼,直到将罩全部打开处于自然湿度下为止。 5.定植 将苗转移到土中培养，即可长成植株并开花。 若使用自然生长的茎进行组织培养方法: 70％乙醇中浸泡10min 5％次氯酸钠溶液中浸泡5min 5％次氯酸钠溶液中浸泡5min 超净台上用无菌水清洗 将茎移至生芽培养基中 思考与练习：P61 1.不同植物、不同组织的生根和生芽是否都可使用与本实验相同的生长素和细胞分裂素浓度？ 2.本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，为什么？ 不可相同 天然激素都有相应的使之分解的酶，所以使用时间短，而人工合成的激素，没有分解酶，作用时间长，效果显著。 3.如果在自然界取植物样本进行组织培养,你认为应采取什么措施保证样本不被污染? （1）操作环境清洁（2）植物样本的洁净（3）操作敏捷迅速 1、外植体带菌 2、培养基及接种器具灭菌不彻底 3、接种操作时带入 4、环境不清洁 污染途径 污染的预防措施 （一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁 愈伤组织 脱分化 已经分化的植物组织停止分裂。 组织从这种状态中摆脱出来，恢复分裂和分化能力的过程称为脱分化。 再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。 MS固体培养基成分及比例 大量元素 微量元素 有机物质 铁盐 小结:植物组织培养 细胞离体 ①必要条件： 一定的营养物质、激素和其他外界条件 ②原理: 细胞的全能性 外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官 ③相关概念: 有条件的同学网上搜索 ‘菊花的组织培养’视频观看 脱分化：指已经分化的植物器官、组织或细胞,当受到创伤或进行离体(也受到创伤)培养时,已停止分裂的细胞,又重新恢复分裂,细胞改变原有的分化状态,失去原有结构和功能,成为具有未分化特性的细胞。 再分化：已经脱分化的细胞在一定条件下,又可经过愈伤组织或胚状体,再分化出根和芽,形成完整植株,这一过程叫作再分化。 愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定性状态的薄壁细胞 流程图 ④过程: 离体组织或细胞 植物体 脱分化 细胞分裂素≈生长素 愈伤组织 芽 根 细胞分裂素生长素 细胞分裂素生长素 再分化