菊花的组织培养教学课件.ppt

土豆发芽 落地生根 1958，美国 斯图尔德 点此播放教学视频 已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能 细胞全能性 细胞 植株 离体 组织培养 在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞，并使其生长、增殖、分化以及再生长成植株的技术。 点此播放教学视频 课题1 菊花的组织培养 点此播放教学视频 什么是细胞分化？ 愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？ 脱分化、再分化？ 一、植物组织培养的基本过程 点此播放教学视频 分化原因是什么？ 在特定时间和空间条件下，基因的选择性表达。 思考： 一植物组织培养的基本过程 1、细胞分化 个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程 点此播放教学视频 离体器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 植物体 植物组织培养的基本过程 根 芽 有丝分裂 点此播放教学视频 细胞排列疏松无规则 高度液泡化 无定形状态的 薄壁细胞。 愈伤组织特点 点此播放教学视频 植物组织培养过程示意图 思考：上面的示意图中还有什么地方不够完善的？ 没有灭菌处理，试管也没有做密封等。 点此播放教学视频 （二）影响植物组织培养的因素 影响组织培养的因素？ 菊花组织培养的过程，及注意的问题？ 点此播放教学视频 1、材料的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 三、影响植物组织培养的因素： 未开花植物的茎上部新萌生的侧枝 点此播放教学视频 MS固体培养基成分及比例 同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ MS培养基：无机营养为主，蔗糖为碳源、常加激素（生长素） 成分 大量元素 硝酸钾　 KNO3 、硝酸铵 NH4NO3 磷酸二氢钾　 KH2PO4 硫酸镁MgSO4.7H2O 氯化钙　 CaCl2.2H2O 微量元素 碘化钾 KI 硼酸 H3BO3 硫酸锰 MnSO4.4H2O 硫酸锌 ZnSO4.7 H2O 钼酸钠 Na2MoO4.2 H2O 硫酸铜 CuSO4.5 H2O 氯化钴 CoCl2.62 铁盐 乙二胺四乙酸二钠 Na2.EDTA 硫酸亚铁 FeSO24.7H2O 有机成分 肌醇、甘氨酸、盐酸、硫胺素 VB1、 盐酸吡哆醇 VB6、烟酸 VB5 或 VPP 蔗糖 sucrose?琼脂 agar 三、影响植物组织培养的因素： 2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等 点此播放教学视频 以下培养基出现的现象说明什么问题？ 生长素　/　细胞分裂素 高 利于根和愈伤组织的形成 适中 利于根芽的分化 3、激素配比对组织培养的影响 浓度、先后顺序、用量的比例 使用顺序 实验结果 先生长素， 后细胞分裂素 易分裂但不分化 先细胞分裂素， 后生长素 既分裂也分化 同时使用 分化频率提高 点此播放教学视频 用量比例 生长素/细胞分裂素 结果 比值高时 促根分化 比值低时 促芽分化 比值适中 促进愈伤组织生长 点此播放教学视频 4、pH、温度、光照（菊花组培） pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h 5、消毒 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境 点此播放教学视频 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 四、实验操作 移 栽 冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 配制各种母液 配制培养基 灭毒 点此播放教学视频 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 点此播放教学视频 本课题内容小结 菊花组织培养 基础知识 实验操作 植物体的组织培养