转基因植物课件.ppt

3、转基因食品是否还会存在着抗营养因子、基因的次级效应？ 　答案是：无定论，需要更多、更深入地研究。 （二）转基因植物的食品安全性 转基因植物安全性评价之我见 对转基因植物的生产存在着支持与反对两大派，其中大多数人持严格管理、谨慎发展的支持态度。 转基因的安全性要因具体基因来论，而且需要采取更科学更完善的方法来评价，需要跟踪长期效应，需要更大量的实践来证明、更需要完善的法规和道德来约束。目前仍未发现不安全的转基因现象。 目前各国对转基因食品的限制除了认知上不同外，更重要是与经济和外贸壁垒有关。 本章小结：转基因植物 体外重组 转化体 结合常规育种 遗传稳定性 评价 转基因品种 安全性评价 市场开发 基因分离 载体的构建 农杆菌介导 基因枪轰击 转化 筛选 （三）目的基因分子水平检测 检测方法： DNA水平上：PCR、Southern blot、测序法 RNA水平上：Northern blot、RT-PCR、 Real-time PCR 蛋白水平上：Western blot、ELISA等。 DNA mRNA 蛋白质 功能产物 转开花基因烟草植株PCR初步检测 NPT II EJLFY PCR检测法 优点：对DNA样品需量少，故在较早期可进行初步鉴定；操作简单、快速、费用低。 缺点：存在一定的假阳性；不能确定目的基因整合进植物基因组的具体位点信息。 Southern blot法 检测原理：探针与DNA的互补配对原理。 优点： 检测结果可信度高； 可以获得外源基因在基因组中的拷贝数、整合位点信息等。 缺点： 对样品DNA需量较多，故只能在成苗期进行鉴定。 操作程序繁杂、需时较长、费用高。 被Xba I酶切 EJLFY 线杂交 DNA水平鉴定 点杂交 RT-PCR检测 Northern mRNA水平鉴定 Protein水平检测 检测方法：Western blot 、 ELISA 。 检测原理：抗原抗体（探针）结合反应原理。 检测目的： 　＊外源基因是否已在Protein水平上发生了翻译表达。 　　包括外源基因的转译活性大小、蛋白质的含量及分子量大小、稳定性等。 Western dot-blot §10-2、3 转基因植物应用： 基因改良、生物制药 ? 抗除草剂的转基因植物（最早进入田间生产，目前栽培面积最 大）如 Monsanto 的抗除草剂草甘膦大豆 ? 抗虫转基因植物 如 转Bt 抗虫棉、玉米 ? 抗病转基因植物 （抗病毒，抗真菌，抗细菌） ? 抗环境胁迫转基因作物 （温度、水分、化学物） ? 植物发育调节基因工程 （控制果实成熟，雄性不育，改良植物品质） ? 医药领域中的转基因植物（利用植物作为生物反应器，生产药用蛋 白、食用疫苗等） 转Bt抗虫棉 遭受虫害的普通玉米 抗虫的Bt转基因玉米 转Bt抗虫欧洲山杨 抗病毒的番木瓜 结果: 转基因的番木瓜抗PRSV病毒（番木瓜环斑病毒导致全世界的番木瓜严重减产） 导入的基因: PRSV外壳蛋白基因 转基因方法: 基因枪法　　完成人: Gonsalves(美国)等 抗CMV病毒转基因番茄 抗CMV病毒转基因甜椒 转查尔酮合酶矮牵牛花 抗除草剂的白杨 抗除草剂大豆 早开花的欧洲山杨 结果: 转基因的童期仅5个月，非转基因的8-20年 导入的基因: 拟南芥LFY基因，农杆菌介导法 文献: Nature, 1995, 377:495-500 转鱼抗冻基因的耐寒番茄 Golden Rice 样品比较（左为普通棉花，右为兔毛转基因棉花） 转基因品质改良 药用蛋白包括生长激素、抗体、生长因子等。 老鼠抗体轻链 转基因植物生物制药 老鼠抗体轻链 功能性抗体 转乙肝抗原基因的西红柿 预防乙肝 Are Transgenic Plants Safe? §10-4 转基因植物的安全性 羞羞答答的 转基因大豆油 转基因植物安全性评价 环境生态安全性 如：转Bt作物对昆虫群落的影响及害虫的抗性、基因漂流问题；超级杂草现象。 食品安全性 如：抗生素抗性、Bt蛋白毒性、过敏性等。 （一）转基因植物的环境安全性 1、转基因植物是否会比非转基因植物在自然界生存中具有竞争性优势？ 　　答案是：大多不会。 　　大量田间试验表明：抗虫、抗病、抗除草剂、抗逆等转基因（具有难抵抗的杂草性质）植物一旦离开了选择压特定的环境，其生存竞争性并不比非转基因植物强，因此基本不会导致农田“超级杂草”的出现。 2、转基因是否会通过自然杂交“基因漂流”到近缘野生种植物、昆虫或微生物中？ 　　答案是：只要严格控制，风险几乎微乎其微。 自然界中自古就存在着天然杂交，即发生了基因漂流