QC-OP-007-v1-在非免鸭胚上进行的产蛋下降综合征病毒灭活检验.docVIP

操作细则 质量检验部 扬州威克生物工程有限公司 文件编号：QA/OP/*** 版本：1 生效日：2008-01-2 PAGE 4/ NUMPAGES 10 页 标题： 在鸡胚上进行新城疫病毒、禽流感病毒（H9）的灭活检验 操作细则 质量检验部 扬州威克生物工程有限公司 文件编号：QC/OP/007 版本：1 生效日：2008-05-16 PAGE 2/ NUMPAGES 10 页 标题： 在非免鸭胚上进行产蛋下降综合征病毒的灭活检验 制作 审核 批准 姓名: 日期: 签名: 姓名: 日期: 签名: 姓名: 日期: 签名: 1. 历史记录?: 版本号 变更描述 发布日期 1 初次发布 2008-05-16 2. 需要发放的部门: 质检部（QC），质量部（QA） 摘要 目录 TOC \o 1-5 1. 目的 3 2. 原理 3 3. 材料 3 4. 方法 4 4.1. 第一代灭活检验 4 4.1.1. 准备样品 4 4.1.2. 准备蛋胚 4 4.1.3. 蛋胚接种 4 4.1.3.1. 阴性对照 5 4.1.3.2. 样品 5 4.1.3.3. 阳性对照 5 4.1.4. 鸭胚孵化 5 4.1.5. 收获第一代蛋胚尿囊液 5 4.2. 第二代灭活实验 6 4.2.1. 准备蛋胚 6 4.2.2. 蛋胚接种 7 4.2.3. 蛋胚孵化 7 4.2.4. 读结果 8 5. 结果 8 5.1. 如果满足下面条件该检验有效： 8 5.2. 如果满足下面条件该检验结果合格： 8 6. 相关文件 8 7. 附件 8 操作细则 质量检验部 扬州威克生物工程有限公司 文件编号：QC/OP/007 版本：1 生效日：2008-05-16 PAGE 8/ NUMPAGES 10 页 标题： 在非免鸭胚上进行产蛋下降综合征病毒的灭活检验 操作细则 质量检验部 扬州威克生物工程有限公司 文件编号：QC/OP/007 版本：1 生效日：2008-05-16 PAGE 9/ NUMPAGES 10 页 标题： 在非免鸭胚上进行产蛋下降综合征病毒的灭活检验 目的 描述在非免鸭胚上检验样品中产蛋下降综合征病毒是否被灭活彻底的方法。 原理 将活的产蛋下降综合征病毒接种到鸭胚尿囊液里后，病毒繁殖后到尿囊液里，使尿囊液能凝集红细胞。如果接种后不能使尿囊液凝集红细胞，那么证明被检病毒已被完全灭活。 材料 8 - 10日龄非免鸭胚 样品 标准 产蛋下降综合征活病毒 超净工作台 37.5 ℃ ± 5 ℃ ± 3 -30 ℃ ± 3 闹钟 照蛋器 蛋钻 碘酊棉球 振荡器 灯 蛋盘 吸管泵 100 μl - 1000 μl 微量移液器 20 μl - 200 μl 微量移液器 试管架 无菌剪刀 玻璃平板 1000 μl滴头盒 200 μl滴头盒 0.9%生理盐水，含有1%的抗生素 2.5%青链霉素抗生素溶液 2% 红细胞悬液 10 ml无菌吸管 1.0 ml无菌注射器 15 ml无菌试管 1000 μl无菌滴头 200 μl滴头 蜡块 记号笔 标签纸 记录表格 方法 在两代中的任何一代，接种样品的鸭胚的死亡率都不能超过10%，如果超过了10%，需要重新进行检验。 第一代灭活检验 接种的顺序是： 生理盐水 样品 标准产蛋下降综合征活病毒 准备样品 样品保存在5 ℃ ± 3 取出样品放入超净工作台中并按5.0 ml样品加入5.5 μl抗生素的比例加入抗生素。 标记样品：“已加抗生素”。 在振荡器上充分混匀样品和抗生素。样品已可以使用。 样品准备好以后，若不立即进行检验，把样品储藏在5 ℃ ± 3 准备蛋胚 照8 ~ 10日龄的非免鸭胚并用记号笔标记上接种部位（在气室的下缘且无大的血管处）。 按如下数量为每次检验选择非免鸭胚： 每一样品：10个非免鸭胚 阳性对照：5个非免鸭胚 阴性对照：5个非免鸭胚 给每组非免鸭胚标记如下信息： 样品名称 样品批号 代次 接种物 例如，要进行批号产蛋下降综合征活性成分的第一代灭活检验： 在10个用于接种样品的非免鸭胚上标记：“EDS第一代” 在5个用于阳性对照的非免鸭胚上标记：“EDS阳性对照，第一代” 在5个用于阴性对照的5个非免鸭胚上标记：“EDS阴性对照，第一代” 将标记好的非免鸭胚放到蛋盘上。 给蛋盘标记上如下信息： 活性成分的名称 批号 代次 开始日期 结束日期 对接种部位用碘酊棉球消毒。 蛋胚接种 把样品、生理盐水和产蛋下降综合征标准活病毒放入超净工作台中。 在标记的接种部位用蛋钻打一个孔，在气室的顶部打上另一个孔。 把摆放有