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淋病实验室诊断 1 主要内容     淋球菌及致病性 淋病实验室诊断 淋病实验室诊断策略 小结 2 一、病原菌与致病性 奈瑟氏淋球菌是淋病的病原菌，主要引起泌尿生殖系统化脓性炎症。淋病的潜伏期平均3-5天,淋球菌主要侵犯上皮细胞,尤其是柱状上皮细胞。 3 男性：引起尿道炎，可合并前列腺炎、精囊炎、 附睾炎。 女性：引起宫颈炎、尿道炎，可合并子宫内膜炎、输卵管炎或输卵管卵巢脓肿、盆腔炎、肝周炎、前庭大腺炎等。 男女：都可引起淋菌性肛门直肠炎、淋菌性咽炎、淋菌性结膜炎，都可合并播散性淋球菌感染。有5%-20%的男性和60%的女性病人呈无症状经过。 4 一. 病原菌（萘瑟氏淋球菌） 1.形态 (1).形态呈肾形或蚕豆形，常成对排列，邻近面扁平或略凹陷。无芽孢、无鞭毛。 (2).大小为0.6-0.8μm。 (3).革兰氏染色阴性，呈粉红色。美蓝染色呈蓝色。 急性炎症期病人，细菌多在患者分泌物的白细胞胞浆中。慢性炎症期病人，细菌多在白细胞外。 5 2、生物学特性 (1).淋球菌适宜在潮湿、温度为35-36℃、含5-7%二氧化碳的条件下生长。生长最适PH为7.2。 (2).淋球菌对外界理化因素抵抗力均差，在完全干燥环境中只存活1-2小时，室温存活1-2天，50℃时存活5分钟。附着于衣裤能存活18-24小时。 6 (3).淋球菌为需氧菌，对培养的要求较高，普通培养基不易生长， 在含有动物蛋白的培养基上生长良好。 (4).能分解葡萄糖、产酸不产气。 (5).生长过程中产生氧化酶。还产生自溶酶。 7 淋病的传播途径有以下二种： 1)直接性接触感染：成人淋病几乎全部通 过性接触感染。 2)间接接触感染：新生儿可通过母亲 产道分泌物间接感染。 8 二、淋病的实验室诊断方法    分泌物涂片镜检； 分离培养淋球菌； 检测淋球菌核酸：PCR 9 1、标本的采集  取材部位依据 年龄 性别 性接触方式 临床表现  取材拭子种类 藻酸钙拭子 普通棉拭子 涤纶拭子 10 标本的采集-取材部位(1) 男性   异性恋者:采集尿道标本，有口淫史者加取咽部标本； 同性恋者: 采集尿道、直肠及咽部标本. 女性 采集宫颈标本，必要时从尿道、直肠、咽部、前庭大腺 和尿道旁腺取材. 11 标本的采集-取材部位(2)   幼女 幼女和/或处女膜未破的感染者标本：采集阴道分泌物 新生儿眼炎患者 采集眼结膜分泌物 12 标本的运送 淋球菌的抵抗力弱，对热敏感，不耐干燥。 取材后标本若不能立即接种于选择培养基上， 需采用运送系统。置于非营养性运送培养基中 的标本应在12小时内送到实验室，接种于选择 培养基，分离阳性率可达90%以上。超过12小时 则分离阳性率下降。 13 2、显微镜检查 1.染色涂片的制备： 涂片方法 在干净玻片上预加一小滴生理盐水。 * 用白金耳蘸取样时，应将白金耳半悬状态使分泌物洗脱于盐水； * 用棉拭子取样时，应将棉拭子在盐水处轻轻“滚动”，而不是涂抹。 * 自然干燥后, 涂漠面朝上快速通过火焰三次固定。 14 显微镜检查 注意事项： * 涂片手法要轻，避免细胞破裂。薄厚得当，以基本无细胞重叠为宜； * 火焰固定以涂片在腕背皮肤接触时仅感微热为宜； * 避免用加热法使湿片干燥，避免固定时过度加热,以免扭曲细胞形态。 15 显微镜检查 染色方法:     革兰染液 美兰染液 姬姆萨染液 荧光抗体 革兰染色为一传统方法，因简便、快捷及价廉、仍然 为最广泛采用的方法。革兰染色将菌分为二大类，即染成 紫色的革兰阳性菌及染成红色的革兰阴性菌。 16 直接显微镜检查 革兰染色:    涂片：将拭子在载玻片上轻轻滚动涂片。 固定：待涂片在室温中空气自然干燥， 涂片经火焰固定 革兰染色： ⑴第一液（结晶紫）染30~60秒，流水冲洗数秒； ⑵第二液（碘液）染60秒，水洗； ⑶第三液（95%乙醇）脱色30~60秒，水洗； ⑷第四液（复红）复染30秒，水洗。 17 革兰染色：细胞内革兰阴性双球菌 18 直接显微镜检查的临床意义    男性淋菌性尿道炎的尿道标本 敏感性及特异性可高达95%～99%，具诊断价值。 宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时 敏感性仅40～70%。 不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部，以及女性宫颈 淋球菌感染。 亦不能用于疗后判愈。如果在多形核细胞 外见到形态典型的革兰阴性双球菌，需做培养进行确证。 19