实验七 紫外吸收法测定蛋白质含量;一、 实验目的:;二、 实验原理:;;本法操作简便迅速,且不消耗样品(可以回收),低浓度的盐类不干扰测定,在蛋白质和酶的生化制备及其它研究中应用广泛,多用于纯化之蛋白质的微量测定,尤其是适合于柱层析分离中蛋白质洗脱情况的检测。
核酸在280nm波长下也有一定吸收能力,可能发生干扰。混有核酸时必须分别测定280nm和260nm两处的OD值,然后根据两种波长的吸收度的比值,通过经验公式校正,以消除核酸的影响而推算出蛋白质的真实含量,再按公式推算蛋白质含量。;三、 实验材料、主要仪器和试剂;四、操作步骤;;;分光光度计的使用;分光光度计的分类;分光光度计的基本结构;紫外分光光度计 ;紫外可见分光光度计使用方法(1);分光光度计使用注意事项 ;
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