课件:免疫比浊法检测免疫球蛋白.ppt

散射比浊法的缺陷 (1)因为是一次性测定光吸收值,没有考虑每一个待测样本的吸收和散射效果,可测定结果不准确 (2)测定的仍是抗原-抗体反应的第二阶段,不适合快速检测。 (3) 终点法存在反应本底,测定样本的含量越低本底比例越大,故在微量测定时,本底的干扰是影响准确测定的重要因素。 影响免疫比浊测定的因素 1、抗原抗体比例 2、抗体的质量 抗体的特异性、效价、亲和力 3、反应的溶液 4、增浊剂的使用 1、透射比浊操作简便,适用于普通的自动生化分析仪和普通的分光光度计,几乎所有的实验室均能开展。不足的是灵敏度和精密度均不够理想,所需的抗血清量大,检测的周期较长。 2、散射比浊的优点是灵敏度、精密度均较高,检测快速。其缺点是需特定的分析仪器,试剂价格高。 透射比浊法和散射比浊法优缺点比较 免疫浊度法测定中应注意的问题 1、伪浊度的影响 ?????????? 伪浊度形成原因很复杂,主要是抗血清含有非特异性的交叉反应性杂抗体成分;增浊剂浓度和反应时间掌握不当;样品本身的浊度处理不当;试剂的污染和变质;器材尤其是比色杯等不够清洁等因素。 2、非特异性散射光的影响 ????? 免疫浊度法经常受内源性光散射的干扰,为避免这些非特异性光散射的影响,应用透射比浊法时需保证抗体组分在3%以下,散射比浊法需保证在 0.5%以下。?? 本实验中应用聚乙二醇的生理特性 聚乙二醇

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