Toll样受体系统在肾脏衰老中的表达变化.docVIP

PAGE PAGE 1 Toll样受体系统在肾脏衰老中的表达变化 　　[摘要]目的观察Toll样受体（TLRs）系统在肾脏衰老中的表达变化。方法用免疫印迹和实时定量PCR（qRT-PCR）技术分析3月龄组（青年组，n=20）、12月龄组（中年组，n=20）和24月龄组（老年组，n=20）大鼠肾脏中TLRs系统分子、核转录因子（NF-κB）信号通路分子以及炎症因子包括趋化因子配体3（CCL3）、CCL4、CCL5、CD80、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-12b（IL-12b）的表达变化情况。结果①12月龄组和24月龄组体重[（466.86±32.62）、（617.8±57.34）g]、肾重[（43.25±0.50）、（5.01±1.00）g]、三酰甘油（TG）[（2.32±0.46）、（3.22±0.82）mmol/L]和尿蛋白/肌酐比值[（164.81±38.31）、（256.00±49.39）mg/mmoL]高于3月龄组[（236.3±12.28）g、（1.67±0.68）g、（1.20±0.32）mmol/L、（146.01±22.72）mg/mmoL]，差异有统计学意义（P0.05）；24月龄组大鼠血尿素氮（BUN）水平[（6.86±1.10）mmol/L]高于3月龄组[（5.73±0.47）mmol/L]，差异有统计学意义（P0.05）；而血肌酐（SCR）、血糖（GLU）和胆固醇（CHOL）水平三组差异无统计学意义（P0.05）。24月龄组肾重[（5.01±1.00）g]和尿蛋白/肌酐比值[（256±49.39）mg/mmoL]高于12月龄组[（3.25±0.50）g、（164.81±38.31）mg/mmoL]，差异有统计学意义（P0.05）。②12月龄组和24月龄组TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR11表达水平均高于3月龄组，24月龄组TLR1和TLR3水平高于3月龄组，24月龄组TLR9水平高于3月龄组，差异均有统计学意义（P0.05）；三组TLR6、TLR7、TLR10水平差异无统计学意义（P0.05）；TLR8未检测到。24月龄组TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR11水平高于12月龄组，差异均有统计学意义（P0.05）。③12月龄组和24月龄组IK-Bα和活化的磷酸化NF-κBp65（Phospho-NF-κBp65）水平高于3月龄组，差异有统计学意义（P0.05）；24月龄组NF-κBp65水平高于3月龄组，差异有统计学意义（P0.05）。24月龄组NF-κBp65和Phospho-NF-κBp65水平高于12月龄组，差异有统计学意义（P0.05）。④24月龄组CCL3、CCL4、CCL5、CD80、TNF-α和IL-12b水平高于3月龄组，差异有统计学意义（P0.05）；12月龄组CD80和IL-12b水平低于3月龄组，差异有统计学意义（P0.05）。24月龄组CCL3、CCL4、CCL5、CD80、TNF-α和IL-12b高于12月龄组，差异有统计学意义（P0.05）。结论TLRs系统可能通过激活NF-κB信号通路、促进炎症因子的表达而在肾脏衰老过程中发挥重要作用。 　　[关键词]Toll样受体；天然免疫；衰老；肾脏；NF-κB通路；炎症因子 　　[中图分类号]R699.2[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2013）05（b）-0011-05 　　Toll受体（Toll-likereceptors，TLRs）是天然免疫系统的受体之一，在启动和调节天然免疫应答及诱导获得性免疫中发挥重要作用。在哺乳动物中已发现11种TLRs成员。TLRs是一种特定的模式识别受体（patterncognitionreceptors，PRRs），能识别细菌等病原体的相关分子结构如脂多糖与脂蛋白等分子，然后激活其下游信号通路分子髓样分化因子MyD88（myeloiddifferentiationfactor88）[1]。MyD88是TLRs信号通路重要的信号适配器，当被活化后可进一步激活IKK-NF-κB信号通路或JNK-NF-κB信号通路，促进免疫炎性因子的表达[2-3]。TLR3则通过激活MyD88非依赖性信号通路促进炎症分子的表达。 　　虽然已经提出多种衰老学说如氧化应激（oxidativestress）等，但是目前衰老的机制还不是很清楚[4-5]，近年研究表明免疫炎症可能与衰老的发生有关[6]。肾脏是人体内能量代谢非常活跃的器官，因此肾脏易于发生衰老，老年人肾脏功能随年龄的增加逐渐降低[7]，但是肾脏器官衰老的机制并不清楚。TLRs系统和肾脏衰老的关系目前尚不清楚。 　　本研究拟通过研究TLRs及其下游MyD88信号通路分子炎症因子在3、12、24月龄