核酸类药物分析 .PPTVIP

第三节　应用实例 一、巯嘌呤 巯嘌呤为次黄嘌呤类似物，通过抑制核酸合成而发挥抗肿瘤作用。药用为含 一个结晶水的巯嘌呤。本品主要经化学合成法制备。 巯嘌呤主要以氰乙酸乙酯为原料进行合成。在加热的无水乙醇与乙醇钠溶液中， 氰乙酸乙酯先与硫脲环合生成２－巯基－４－氨基－６－羟基嘧啶，经亚硝基化、还原 得２－巯基－４，５－二氨基－６－羟基嘧啶，然后在活性镍的作用下，消除巯基得４， ５－二氨基－６－羟基嘧啶，进一步与甲酸环合成６－羟基嘌呤，然后在吡啶溶液中与 五硫化二磷在１１８℃反应４ｈ制得巯嘌呤。 （一）鉴别 （１）本品加乙醇溶解后，与醋酸铅乙醇溶液反应，生成巯嘌呤铅黄色沉淀。 （２）巯嘌呤分子上的巯基（—ＳＨ）与强氧化剂浓硝酸作 用，被氧化成６－嘌呤亚磺酸，进一步氧化成黄色的６－嘌 呤磺酸，再与氢氧化钠试液反应，生成呈黄棕色的６－嘌呤 磺酸钠。 （３）巯嘌呤分子上的巯基（—ＳＨ）与氨试液反应，生成 铵盐，溶解度增大，溶液变澄清，再与硝酸银试液反应，生 成溶解度较小的巯嘌呤银白色絮状沉淀，在热硝酸中不溶。 （４）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。 （二）检查 １. ６－羟基嘌呤　 ６－羟基嘌呤为巯嘌呤的合成中间体，其结构与巯嘌呤仅差一个取代基：一个是羟基取代，一个是巯基取代。精制不完全会有残留，对巯嘌呤的安全使用有影响。 《中国药典》（２０１５年版） 利用两者在紫外吸收图谱上的差异，采用紫外－可见分光光度法对６－羟基嘌呤的量进行控制，巯嘌呤在３２５ｎｍ处具有强烈的紫外吸收，而６－羟基嘌呤的最大吸收波长在２５５ｎｍ、３２５ｎｍ处基本无吸收，故通过规定２５５ｎｍ与３２５ｎｍ波长处的吸光度比值不得过０.０６，即可对６－羟基嘌呤的量进行控制。 ２.硫酸盐　 本品在生产过程中可能产生硫酸盐杂质， 《中国药典》（２０１５年 版） 采用在盐酸溶液中，不得与氯化钡反应产生浑浊现象来控制硫酸盐 杂质。 ３.水分　 对于含有结晶水的药物需对其水分进行测定，巯嘌呤水分的含量约为 １０.６％， 《中国药典》（２０１５年版） 规定采用费休氏法测定水 分，含量应在１０.０％ ～１２.０％。　 ４.重金属　 巯嘌呤分子结构中含有可与重金属结合的巯基，采用第一 法进行重金属检查会产生假阴性的结果，故《中国药典》 （２０１５年版）采用第二法（炽灼后的硫代乙酰胺法）对 巯嘌呤中的重金属进行检查。该法需先将供试品高温炽灼破 坏成无机物后再进行重金属检查，炽灼温度对检查结果影响 较大，温度越高，重金属损失越多，因此炽灼温度应控制在 ５００℃ ～６００℃。 （三）含量测定 巯嘌呤具有很强的紫外吸收，在０.１ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶液中，其最大吸收 波长３２５ｎｍ处的吸收系数可达１２６５。《中国药典》（２０１５年版） 采用紫外分光光度法中的吸收系数法对其进行含量测定。 具体方法：取本品，精密称定，加０.１ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶液溶解并定量稀释至 每１ｍｌ中约含５μｇ的溶液，照紫外可见分光光度法，在３２５ｎｍ的波长 处测定吸光度，Ｃ５Ｈ４Ｎ４Ｓ的吸收系数（Ｅ１％１ｃｍ）为１２６５，计 算即得。 二、三磷酸腺苷二钠 三磷酸腺苷二钠为核苷酸衍生物，直接参与体内脂肪、蛋白质、糖、核酸以及核苷酸的代谢，与组织生长、修补及再生均有密切关系，是体内能量的主要来源，能扩张冠状动脉及周围血管，具有改善机体代谢的作用。 药用三磷酸腺苷二钠为二钠盐，含３个结晶水。临床上主要用于心力衰竭、心肌炎、脑动脉硬化、脑出血后遗症、急性脊髓灰质炎、进行性肌肉萎缩等疾病的治疗。目前三磷酸腺苷二钠生产方法主要为发酵法。以腺嘌呤核苷酸为原料，在啤酒酵母的发酵条件下生成三磷酸腺苷，然后进一步纯化、结晶成三磷酸腺苷二钠。 你们好 核酸类药物分析 第一节 概 述 第二节　分析方法 第三节　应用实例 第一节 概 述 一、结构与分类 核酸类药物可以通过帮助恢复正常代谢或干扰某些异常代谢来达到治疗疾病的目的。 核酸是由多个单核苷酸通过３′，５′磷酸二酯键聚合而成的生物大分子，单核苷酸的基本结构包括核苷和磷酸，核苷是含氮碱基（嘌呤碱与嘧啶碱） 与戊糖通过糖苷键缩合而成。根据戊糖的种类可将核酸分为核糖核酸和脱氧核糖核酸。 核酸、核苷酸类药物是指具有药用价值的核酸、核苷酸、核苷和碱基以及它们的类似物或衍生物。 按照化学结构和组成可分成四类： ①核酸碱基及其衍生物，如硫鸟嘌呤、氟尿嘧啶、阿昔洛韦等； ②核苷及其衍生物，如肌苷、利巴韦林、阿糖胞苷； ③核苷酸及其衍生物，如三磷酸腺苷二钠、胞