高中生物第二章细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术讲义新人教版选修.pptVIP

2.2.1动物细胞培养和核移植技术 2.2 动物细胞工程 动物细胞工程： 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体等 动物细胞培养 对于皮肤烧伤的病人该如何治疗 概念 动物细胞培养就是从动物体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 原理： 细胞增殖 一、动物细胞培养 细胞株、细胞系 取动物组织块 剪碎组织 胰蛋白酶处理 细胞培养 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 此处细胞在该生活环境中能无限生长和增殖吗？ 分散成单个细胞 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质。 动物细胞培养过程 动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 剪碎 胰蛋白酶 原代培养 传代培养 无限传代 10代以内，保持正常二倍体核型 加培养液制成 单个细胞 分瓶继续培养 动物细胞培养液的主要成分 1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 营 养 需 要 基本营养物质：包括水、葡萄糖、氨基酸、 维生素及一些无机离子。 血清： 体外培养细胞既需要上述基本营养物质，还需要促细胞生长因子等物质才能正常生长、繁殖。血清中含有多种这类物质，有利于多数细胞的存活和生长。 较植物组培培养基有何独特之处？ 动物细胞培养条件 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、维生素、微量元素、动物血清、血浆等） 3、温度和PH 温度36.5+0.5度，pH7.2～7.4 4、气体环境O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95% 空气加5%Co2的混合气体的培养箱中进行培养 维持培养液的PH值 动物细胞生长特性 细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 要求： 有关概念 从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 原代培养： 传代培养： 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 如何界定原代培养和传代培养;细胞株和细胞系？ 遗传物质改变 遗传物质未改变 洗涤、稀释、分离 多数组织细胞固定在表面生长和分裂。 随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 50代细胞 无限传代 单个细胞 加培养液 植物组织培养和动物细胞培养的比较 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 根、芽 植物体 脱分化 再分化 接种至培养基 动物细胞培养 植物组织培养 植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的 获得细胞 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 快速繁殖、培育无病毒植株等 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 液体培养基 固体培养基 细胞增殖 动物细胞培养技术的应用 生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等 健康细胞培养：如获得大量自身的皮肤细胞， 用于植皮。 用于检测有毒物质 用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据 二、动物细胞核移植技术和克隆动物 将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物） 分 类 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度高，恢复全能性不容易 (一) 动物细胞核移植概念 卵细胞 黑面绵羊 白面绵羊 乳腺细胞 早期胚胎 C母绵羊子宫 多利羊 多利羊的培育过程 融合后的卵细胞 2001年11月3日下午6点零5分，在莱阳农学院动物胚胎工程中心实验场，一头名叫“桂花”的黑白花奶牛，只用了15分钟，就顺利产出一头全身黑色的雌性肉牛，专家们给它起了一个吉祥的名字“康康”。 （二）体细胞核移植的过程（以高产奶牛为例） 培养 取出核 甲牛 供体 乙牛 受体 去除核 重组 卵细胞 核植入 卵裂 早期重组胚胎