伊红I色法检测中华绒螯蟹活精子率P染.pdfVIP

第 3l卷增刊 水 产 学 报 Vo1．31，Supp1． 2007年 9月 JOURNAL 0FFISHERIESOFCHINA Sep．，2007 文章编号：1000-0615(2007)增刊一0069—05 伊红、PI染色法检测中华绒螯蟹活精子率 孙菊香，范丽君，贾林芝，厉小波， 陈东华， 曲 迪，王 群 (华东师范大学生命科学学院，上海 200062) 摘要：以伊红和 PI两种染色法，结合光学显微镜和流式细胞仪对 中华绒螯蟹 (Eriocheir sinensis)精子的存活率进行评价研究。将新鲜精子和 6O℃水浴处理致死精子以不同比例混 合，配成含有死精子比例为O％、20％、40％、60％、80％、100％的6个浓度梯度，将其作为 “理 论死亡率”，分别用上述两种染色法进行检测。结果表明：伊红能有效区分死、活精子，其实测 精子死亡率与 “理论死亡率”之间具有明显的相关性，相关系数为 R=0．98(P0．01)；经 PI 染色后通过流式细胞仪分析发现，其实测精子死亡率与 “理论死亡率”同样具有极好的相关 性，相关系数为R=0．99(P0．01)。对伊红和PI两种染色法进行相关性比较分析，认为PI 染色流式细胞仪检测法在检测中华绒螯蟹精子活力方面更具灵敏性，结果更可靠。 关键词：中华绒螯蟹；精子活力；伊红；碘化丙啶；流式细胞仪 中图分类号：S917 文献标识码 ：A DetectionofmortalityofEriocheirsinensissperms stainedbyeosinandpropidium iodide(PI) SUNJu-xiang，FANLi-jun，JIALin-zhi，LIXiao-bo，CHENDong-hua，QuDi，WAN GQun (Schoolof science，EastChinaNormalUniversity，Shanghai200062，China) Abstract：ThemortalityofspermsofEriocheirsinensiswasdetectedusingmicroscopeand flow cytometry (FCM)aftereosinorpropidiumiodide(PI)stain．Thosespemrskilledat60oC(waterbath)weremixed withfleshonesSOastoobtainsixscalarconcentrations(0％，20％，40％，60％，80％，100％)(fordead spemrs)，whichwerereferredtoastheoreticalmortalityanddetectedbyeosinnadPIstain．Resultsshowed htatdead spemr scouldbediscrimi natedfrom liveonesby eosin stain．Furthemr ore，correlation didexist betweenhteoreticalnadpracticalmortalityofspemr swihtcorrelationcoefficientR=0．98(P0．01)．After PIstainnadFCM detection，abettercorrelationindicatedwihtcorrelationcoefficientR=0．99(P0．01)． Th erefore，PIstainalongwiht FCM detectionisna excellentmehtodtonaalyzehtemortalityofspermsof Eriocheirsinensis． Keywords：Eriocheirsinensis；spemr viability；eosin；PI；flow cytometer 精子质量直接关系到该物种的繁殖和子代的 子质量评价的研究已有大量报道，为该领域其它 遗传品质，目前有关哺乳动物 卜