复旦大学生化课件噬菌体策略.pptVIP

cro和cI对转录的影响 cro蛋白对cI基因和cro基因的转录都起负控制作用 cI蛋白对cro基因的转录起负控制作用；对cI基因本身的转录既有正控制又有负控制 cro蛋白和cI蛋白相互竞争、相互制约， λ的调控存在于这两种蛋白的相互作用中 融合操纵子技术 构建融合操纵子质粒 lac I的产物阻遏cI的表达 将质粒转化到特定的溶原性E.coli中 由l ORPRM 启动的lac Z 培养基中加入诱导物-IPTG 质粒表达的cI蛋白对由ORPRM启动的lac Z产生影响 测定β-半乳糖苷酶的活力可以衡量这种影响 把PRM换成PR ，可以研究cI蛋白对PR的影响 把cI换成cro，可以研究cro蛋白对PRM、PR的影响 cI和cro对PRM、PR的影响 cI蛋白的自我调节 3.6.7 cI蛋白的正控制机制 cI蛋白N端helix-turn-helix motif： N端92AA，有5个α-螺旋， α-螺旋3嵌入到DNA大沟中，α-螺旋2及α-螺旋2与α-螺旋3之间的非螺旋部分与RNA聚合酶结合，促进转录 正控制突变分析： 正控制缺陷突变（positive control mutant，pc） 突变发生在第2螺旋或是第2与第3螺旋的连接区 pc突变的cI蛋白阻遏PR启动，失去对PRM的激活作用 Interaction between the l? repressor dimer an