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- 2019-09-03 发布于江苏
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培养基配方
斜面菌种保存培养基
1.1PDA 培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)
称取 200g 马铃薯,洗净去皮切碎, 加水 1000ml 煮沸 0.5h,纱布
过滤,滤液补足 1000ml,再加 15g 葡萄糖和 15-20g 琼脂,充分溶解
后趁热纱布过滤,分装试管,每试管约 5-10ml(视试管大小而定),
121℃灭菌 20 分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用。
1.2 麦芽汁琼脂培养基
麦芽汁的制备:干麦芽首先进行粉碎(不能太粗,也不必太细。
太粗影响糖化效率, 过细影响过滤速度),按麦芽重量的 3~4 倍加水,搅拌均匀后, 37℃左右浸泡 1 小时,然后缓缓加温至 55~63℃(在升温过程中应不断搅拌使温度均匀) ,保温 4~6 小时(用 0.02 摩尔 /升碘液测定为黄色至无色时) ,糖化结束。在糖化过程中,应每小时搅拌一次。取过滤后的清液,加 1.8%琼脂,分装试管,每试管约 5-10ml (视试管大小而定),121℃灭菌 20 分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用。
基菌落总数检测
2.1 平板计数琼脂培养基
将 胰蛋白胨 5.0g、酵母浸膏 2.5g、葡萄糖 1.0g、琼脂 15.0g 加入蒸馏水 1000ml 中,煮沸溶解后, 调 pH,然后在 121℃下灭菌 15min,取出,稍微冷却后,带热倒入培养皿中。
志贺氏菌检测
3.1 GN 增菌液
成
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