高效液相、气相色谱法及红外色谱仪的简单介绍.pptVIP

（2）梯度淋洗装置 外梯度: 利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。 内梯度: 一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。 （3）进样装置 流路中为高压力工作状态， 通常使用耐高压的六通阀进样装置， 其结构如图所示： （4）高效分离柱 柱体为直型不锈钢管，内径1～6 mm，柱长5～40 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。 检测器 紫外检测器 可变波长检测器 光电二极管阵列检测器 荧光检测器 电化学检测器 蒸发光散射 示差检测器 质谱 高效液相色谱法应用实例 环境监测中取代尿素除锈剂的分析—正相液-液色谱分析法。 稠环芳烃的分析—反相键合色谱法 有机氯农药的分析—液-固色谱法 氨基酸的分析—离子交换色谱法 聚合物的分析—空间排阻色谱法 生物活性物质酶的分离—亲和色谱法 红外光谱法 第一节 概 述 与紫外吸收光谱法、核磁共振波谱法及质谱法一起称为四大谱学方法。 原理：当一束红外光照射物质时，被照射物质分子吸收其中部分光能，转变为分子的振动和转动能量，使分子的固有振动和转动从低能级跃迁到较高能级。这种跃迁在光谱上产生的吸收谱带，通常以波长um或波数cm-1 横坐标，以吸光度A或透光率T%为纵坐标。 红外吸收光谱图 红外光谱法的特点 红外光区的划分 λ（μm） σ(cm-1) 跃迁类型 近红外（泛频区） 0.78-2.5 12820-4000 O-H,N-H,C-H键的倍频吸收 中红外（基本振动区） 2.5—50 4000-200 分子振动、转动 远红外（转动区） 50—300 200—33 分子转动， 骨架振动 与紫外吸收光谱法比较： 涉及对象：紫外研究对象是具有共轭体系的不饱和化合物；红外几乎针对所有分子（除单原子分子和同核双原子分子外） 功能：对物质组成、结构提供详细信息。 定量分析：可进行定量分析，但能量小，干扰强。 样品类型：液体、固体和气体试样。 研究范围 近红外区：主要研究稀土和过渡金属离子的化合物，水，含氢原子团化合物的定量分析。 中红外光区（又称红外光谱区）：绝大多数有机化合物和无机离子的基频吸收带都出现在该区，由于基频振动是最强的吸收，适宜进行定性、定量分析。 远红外光谱区：由于低频骨架振动能很灵敏地反应出结构变化，所以对异构体的研究特别方便，还可用于金属有机化合物的、氢键、吸附现象的研究，但由于该光区弱，一般不在此范围内进行分析。 红外吸收光谱法的基本原理 红外吸收光谱产生条件 1.辐射应具有刚好能满足物质跃迁时所需能量。 当一定频率的红外光照射分子时，如果分子中某个基团的振动频率和外界红外辐射的频率一致，就满足了第一个条件。 2.辐射与物质之间有偶合作用（相互作用）。 物质吸收辐射的第二个条件，实质上是外界辐射迁移的能量到分子中去。而这种能量的转移是通过偶极矩的变化来实现的。 色散型红外光谱仪 光源 样品池 单色器 检测器 记录系统 傅里叶变换红外光谱仪 光源 干涉仪 样品池 检测器 记录系统 红外吸收光谱法 红外光谱仪 1、基本结构 光源 单色器 样品池 检测器 记录仪 岛津IR－435 红外分光光度计 色散型红外光谱仪 红外吸收光谱仪 一、色散型红外吸收光谱仪 1、光源：Nernst灯：氧化锆、氧化钇、氧化锗 硅碳棒：惰性固体 2、样品池： 单晶NaCl、KBr、LiF等 气体：玻璃槽，窗口用单晶材料 液体：透光面为单晶 固体：压片 3、单色器：棱镜（单晶）或光栅 4、检测器：热电偶、热电量热计、光电导管 二、傅里叶变换型红外光谱仪（FTIR) FTIR没有色散元件，与色散型红外吸收光谱仪的主要区别在于迈克尔逊干涉仪取代了单色器。 迈克尔干涉仪工作原理图 多色光的干涉图 傅里叶变换红外光谱仪工作原理图 FTIR光谱仪优点(与色散型区别)： 1、光学部件简单，只有一个动镜在实验中转动，不宜磨损。 2、测量范围宽，其波数范围可达到45 000~6cm-1。 3、精度高，光通量大，所有频率同时测量，检测灵敏度高。 4、扫描速度快（1s），可作快速反应动力学研究，并可与气相色谱GC、液相色谱LC联用。 5、杂散光不影响检测。 6、对湿度要求不高。 第五节 红外吸收光谱的应用 一、已知物的鉴定 将试样的红外光谱图与标样的红外光谱图对照，或者与文献上的标准图对照，若两张图各吸收峰的位置和形状完全相同，峰的相对强度一样，