第七章蛋白质分离、纯化.pptVIP

第七章 蛋白质的分离、纯化 蛋白质分离、纯化主要依据 （1）蛋白质的分子大小 透析、超滤、分子筛层析 （2）蛋白质的带电特性 等电点沉淀、离子交换层析、 等电聚焦电泳 （3）蛋白质的溶解特性 硫酸铵分级沉淀、有机溶剂分级分离 蛋白质粗分级 采用简单的实验技术手段，比如盐析、等电点沉淀、透析、超速离心等对蛋白质粗提取液进行初步分离纯化，经浓缩后得到蛋白质粗制品。 四、等电点沉淀法在一定的pH条件下，蛋白质所带的净电荷为零，分子之间的静电排斥力最小，因而容易聚集形成沉淀。该法适用于在等电点pH稳定的蛋白质。 蛋白质细分级 采用分子筛层析、离子交换层析、亲和层析等手段结合多种电泳技术，包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳等进一步对蛋白质粗制品分离纯化，以获得高纯度的蛋白质样品，用于蛋白质结构、功能及其应用研究。 具备条件：1惰性，2水不溶性，3能高度水化。 常用分子筛： 葡聚糖凝胶（Sephadex） 型号：G200、 G150、 G100、 G75、 G50、 G25、 G15 分离大蛋白质、小蛋白质，除盐 琼脂糖凝胶（瑞典Sepharose、美国Bio-GelA） 孔径大，用