实验七酵母核糖核酸的分离及组分鉴定.pptVIP

酵母核糖核酸的分离及组份鉴定 实 验 七 一 实 验 目 的 二 实 验 原 理 二 实 验 原 理 组织匀浆用苯酚处理并离心后，RNA即溶于上层被酚饱 和的水相中，DNA和蛋白质则留在酚层中。向水层加入乙醇 后，RNA即以白色絮状沉淀析出，此法能较好的除去DNA和 蛋白质。 浓盐法使用10%左右氯化钠溶液，90℃提取3-4h，迅速 冷却，提取液经离心后, 上清液用乙醇沉淀RNA。 稀碱法使用稀碱使酵母细胞裂解，然后用酸中和，除去 蛋白质和菌体后的上清液用乙醇沉淀RNA。 二 实 验 原 理 酵母含RNA达2.67-10.0%，而DNA含量仅 为0.03-0.516%，为此，提取RNA多以酵母为原 料。 酵母中的核糖核酸可溶于碱，在碱提取液中 加酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀，由 此得到粗核糖核酸。核糖核酸含有核糖，嘌呤 碱，嘧啶碱和磷酸各组分。加硫酸煮沸可使其水 解，从水解液中可以测出上述组分的存在。 二 实 验 原 理 鉴定方法： (1)磷酸与定磷试剂作用能产生蓝色的钼蓝沉淀。 (2)核糖与地衣酚试剂反应呈鲜绿色。 (3)嘌呤碱与硝酸银产生白色的嘌呤银化合物沉淀。 嘌呤碱的糖苷键比嘧啶碱的糖苷键易于水解 三 仪器、原料和试剂 仪器：试管；试管架；烧杯；移液管； 量筒；滴管；水浴锅； 离心机；离心管；锥形瓶。