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分子生物学知识点总结.doc

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分子生物学 结构分子生物学部分 绪论 ①总述:进化论、细胞学说、生化遗传学、DNA的发现 ②分子生物学:定义、研究内容(四方面) ③发展史:里程碑 ④三个相关学科:生物化学、细胞生物学、遗传学 ⑤中心法则:经典、现代 Ⅰ DNA ①结构:碱基比率、配对规则、种数(4n)、0.34nm的应用(碱基对M/2x,长度0.34×M/2x) ⑴三类DNA(ABZ):结构、形成、特点及Z-DNA的作用 ⑵质粒超螺旋:正负超螺旋定义、转化、意义、计算、主要以负超螺旋存在 ⑶其它:0.34nm的计算、※DNA稳定因素(PO43-)与Tm、Z-DNA不稳 ②性质 ⑴复性:五条件、机制(Cot曲线)、三个吸光度 ⑵修饰:甲基化(ACG) ⑶变性:DNA碱性全变性、90OC以上全变性增色37%、增色效应(Tm) ⑷水解:酸(PH1,=4,甲基化DNA酸水解用处);碱(RNA PH:13,11,DNA去碱基易) 酶(内切、外切) ⑸DNA稳定因素:对应核苷酸的P同电相斥、Na+、Tm ⑹分子伴侣:作用、分类(热休克蛋白、伴侣素)、作用机理(四条) Ⅱ tRNA ①形成:转录成三类,3‘去尾,5’斩头,化学修饰成稀有碱基(I、ψ) ②二级结构:四个臂(受体臂、反密码子臂、D臂、TψC臂),多余臂(2类), tRNA长度决定因素(D臂、多余臂) ③三级结构:特点、二三级氢键、两个双螺旋、转折处()、两端点() 受体臂与反密码子臂距离远及原因 ④功能:转运氨基酸(受体臂3‘-CCA)、解读密码子(反密码子臂) ⑤种类:tRNAi/tRNAe(起始/延伸),同工tRNA(定义)tRNA性质由反密码子决定 Ⅲ 核糖体 ①核糖体的细胞学知识:见细胞生物学 ②三个位点:A、P、E作用 ③原核30S小亚基上16SrRNA反SD序列:结构(3ˊ富含嘧啶区GAUCACCUCCUUA)、作用 Ⅳ mRNA ①真原核比较:帽、尾、单多顺反子、起始密码子个数原核有三个起始密码子 (AUGGUGUUG)、T1/2、原核特有SD序列 ②真核mRNA三类帽:0、1、2类定义 ③原核mRNA的SD序列:5‘,作用,结构 Ⅴ蛋白质与核酶 ①结构域: ②分子伴侣:分类、作用机制 ③核酶:定义、分类(剪接、剪切)剪切分三类:锤头、发夹、丁肝病毒核酶 基因组学部分 Ⅰ 染色体 观察:有丝分裂中期光学显微镜可见 功能:遗传载体 作为遗传物质所需四要素:稳定、半保留复制、产生蛋白质、可变异 Ⅱ 真核基因组 ①组成:DNA(或RNA)+Protain(组、非组) ②DNA:C值与C值反常现象、三序列(不重复、中度重复、高度重复)占序列比例,单/多拷贝 ③组蛋白:六种、特征(保守、特例、氨基酸不对称、修饰、H5-赖氨酸) ④非组蛋白:三种常见,DNA结合蛋白的定义 ⑤真核基因组结构基础--核小体 ⑴组成:200bpDNA+八聚体 ⑵八聚体:2×(H2A+H2B+H3+H4) ⑶结构: 颗粒(八聚体+120bpDNA链,直径10nm,DNA链绕1.65圈) 连接DNA(80bpDNA链+H1,H1作用) 是负超螺旋 ⑥染色单体:螺线管、螺旋n倍 ⑦端粒与端粒酶 ⑴端粒:真核基因组末端,功能(防真核基因组末端结合) ⑵端粒酶:反转录酶、功能(反转录成端粒、连接后随链所得的冈崎片段)、 反转录机理( Ⅲ 原核基因组 ①真原核基因组比较: 大小(真核大,原核小) 复杂度(断裂/连续、大多为调控/表达区、重复序列/重叠基因) 复制(真核多向,原核单向) 转录(单顺反子/多顺反子) 真核特殊(DNA多态性、端粒) ②真原核基因表达的比较:复制、表达连续性及机理 Ⅳ 真核基因组结构 ①hnRNA内含子:GU-AG法则,3‘嘧啶区,5‘保守区、3’上游18-50处的保守区 ②启动子:核心(TATA,决定转录起始位点)、识别RNA聚合酶(CG、CAAT,决定转录起始频率) ③增强子:定义、结构、作用机制、特点、代表(β-珠蛋白基因) ④终止子:两类(依赖/不依赖ρ因子)、结构特点、作用机理、穷追模型 Ⅴ 原核基因组结构 ①启动子:-35区(识别RNA聚合酶),-10区(结合RNA聚合酶) Ⅵ 基因组学 ①几个定义:重叠基因、断裂基因、基因家族、基因簇、超基因家族、假基因、管家基因、奢侈基因、组织特异性基因 ②顺式与反式作用因子: ⑴顺式作用元件:定义,启动子、增强子、沉默子 ⑵反式作用元件:定义,转录复合物 ③人类基因组计划: ④比较基因组学: 基因表达部分 ⅠDNA复制 ①半保留复制:定义、意义、发现(N14N15) ②半不连续复制:前导链、后随链、冈崎片段、过程、实验证明(电泳、30s) ③复制起点:复制叉、复制子、复制起点特征 ④复制方式:线性-眼形,环状-3种(θ型、滚环型、D环型;各对应

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