国家自然基金项目-细胞膜重要脂质代谢产物对重大疾病病理生理过程的调控.pdfVIP

项目名称： 细胞膜重要脂质代谢产物对重大疾病病 理生理过程的调控 首席科学家： 起止年限： 2010 年1 月-2014 年8 月 依托部门： 教育部 一、研究内容 花生四烯酸被COX、LOX 和CYP 三条途径代谢生成上百种结构相似，但具有 不同生物活性的代谢产物，在生命活动和多种重大疾病过程中发挥重要的作用。 然而，许多重要花生四烯酸代谢产物的作用机制和关键的作用靶点等尚不完全清 楚。特别是花生四烯酸代谢一条通路出现异常或者改变时，会如何影响其他代谢 途径、会如何影响生物体的整体代谢，上述影响有什么病理生理学意义等重要问 题仍然需要深入研究。另外，花生四烯酸代谢依赖几十种相关酶的共同作用，而 上百种代谢产物与相应的蛋白质（包括受体、信号分子等）结合和相互作用，共 同介导了花生四烯酸系统对细胞和器官功能的影响。任何外界刺激或细胞功能状 态改变导致的花生四烯酸代谢通路的改变，必然影响各通路代谢产物之间的稳 态，进而造成细胞乃至机体的功能紊乱。本项目将现代生物学方法和转基因/基 因敲除等模式动物相结合，横向研究在不同的生理病理状态下花生四烯酸代谢途 径和产物的变化及其重要代谢产物与相关蛋白质相互作用的机制，进而阐明花生 四烯酸代谢系统在不同病理生理状态下的作用。 （一）关键科学问题： 本项目针对“花生四烯酸代谢通路不同产物之间形成的网络、及其与相关 蛋白质的相互作用机理、影响生物代谢组的规律以及对重要病理生理过程的调 控作用机制”等关键科学问题开展研究。 （二）主要研究内容 围绕我们提出的关键科学问题，根据前述的目前国际和国内研究现状以及我 们具备的条件和前期工作基础，本项目以花生四烯酸代谢为中心，以代谢产物与 相关蛋白相互作用和调节为主轴,针对花生四烯酸代谢产物在重要生理及病理 生理过程中的调节作用，拟运用代谢组学、蛋白组学、结构生物学和模式动物结 合的方法展开研究。本项目主要研究内容将在以下三个层面展开： 1、阐明花生四烯酸的三大代谢通路中不同的代谢产物间的网络调控和代谢 调节的关键因素，以及花生四烯酸代谢改变对整体和特定组织器官代谢组的影 响 （1）首先在细胞水平，研究环氧酶（COX-1 和 COX-2）、脂氧酶（5-LOX， 12-LOX， 15-LOX1 和 15-LOX2）及P450 单氧酶(表氧酶和-羥化酶)三大代谢通 路的代谢产物，以期明确花生四烯酸的所有活性代谢产物代谢谱的变化，并可望 发现新的生物活性物质； （2）运用花生四烯酸三大代谢通路关键合成酶基因的敲除小鼠模型，借助 代谢组学手段研究动物组织、血液和尿液中的花生四烯酸代谢产物以及整体代谢 组的变化规律，以阐明单一通路阻断对其他通路代谢产物的影响； （3）在细胞和整体动物水平研究在单一代谢途径阻断的情况下，重要病理 生理刺激因素对花生四烯酸代谢产物种类和合成水平的影响，以明确花生四烯酸 不同代谢产物间的网络调控机制。 2、重要的花生四烯酸代谢产物与相关蛋白的相互作用 （1）利用结构生物学和分子生物学手段明确COX 及LOX 产物与其相应膜受 体结合的结构基础和介导不同信号通路的分子机制。该研究将有助于阐明同一花 生四烯酸分子调节不同生理和病生理过程以及不同产物参与同一生理及病生理 过程调节的分子基础； （2）研究花生四烯酸代谢产物与代谢性核受体相互作用的机制及其生物学 作用，该项研究将可揭示花生四烯酸代谢产物通过核受体调控重要生理、病理生 理过程的机制及与重大疾病的关系； （3）发现与重要花生四烯酸代谢产物（包括COX 代谢产物前列腺素、前列 环素、血栓素；LOX 代谢物白三烯、5-HETE 和15-HETE 和CYP 代谢物EETs 和 -1 / -HETE）相互作用的新的蛋白分子，以阐明花生四烯酸代谢产物参与重要生 理及病生理过程调节的机制； （4）应用分子和细胞生物学手段在重要花生四烯酸代谢产物受体及其作用 蛋白转基因或基因敲除动物模型中研究相应花生四烯酸代谢产物与相关蛋白质 的相互作用及其机制。 3、花生四烯酸代谢产物对重要生理病理过程的调控作用及其机制 （1）在细胞水平研究重要花生四烯酸代谢产物对细胞增殖与分化、糖、脂 代谢以及炎症过程等重要生理病理过程的影响及其机制； （2）在整体动物水平，利用模式动物和基因敲除动物研究花生四烯酸代谢 产物与上述生理病理过程及其功能紊乱引起的相应重大