水消毒效果鉴定试验.docx

水消毒效果鉴定试验 2.1.4.1 生活饮用水消毒效果鉴定 2.1.4.1.1? 目的? ??? 检测生活饮用水消毒剂与消毒器械的杀菌效果，以验证其对生活饮用水消毒能否达到卫生合格标准。 2.1.4.1.2? 试验器材 ??? (1) 大肠杆菌 (8099) 悬液。取 37℃ 培养 18h～24 h 的新鲜大肠杆菌斜面，用生理盐水洗下菌苔，混匀后再用生理盐水适当稀释，配制成试验用大肠杆菌悬液。 ??? (2) 微孔滤膜滤器和滤膜(滤膜孔径为 0.45μm～0.65 μm，滤膜大小示滤器型号确定，目前常用有直径为 35 mm 和 47 mm 两种)。 ??? (3) 抽滤水泵或气泵。 ??? (4) 恒温水浴箱。 ??? (5) 秒表。 ??? (6) 三角烧瓶。 ??? (7) 广口玻璃瓶 ( 500ml)。 ??? (8) 无齿镊子。 ??? (9) 品红亚硫酸钠培养基：见附录A。 ?? (10) 中和剂(鉴定合格者，见 2.1.1.5 )。 ?? (11) 细菌定量杀灭试验用其他器材(见 2.1.1.7 )。 ?? (12) 天然水样。 ?? (13) 模拟现场消毒装置(见 2.1.4.1.8 )。 ?? (14) 磁力搅拌器。 2.1.4.1.3? 试验阶段 ??? 饮用水消毒效果的鉴定应经过实验室杀菌试验，天然水样消毒试验两个阶段的检测。实验室试验的目的是以大肠杆菌为试验菌，用悬液定量杀菌试验法测出在试管中消毒所需的剂量。天然水样消毒试验是由自然水体取样，进一步验证受试消毒剂或方法对成分较复杂的天然水的消毒效果。对用于较大水体(如人工游泳池水、高层建筑二次供水)消毒的设备和方法，必要时尚需进行模拟现场或现场试验，以进一步验证其消毒效果。 ??? 由于生活饮用水的卫生标准，除微生物外还需考虑化学污染等方面，因此对其安全评价尚需由有关专业单位对其他条件，例如化学物质含量和 pH 值等，进行检测和判定，以对所鉴定的消毒剂或器械做出合格与否的综合评价。 2.1.4.1.4? 试验菌污染水样的配制 ??? 试验用试验菌污染水样用于试验室消毒试验。配制时，将用生理盐水配制的大肠杆菌悬液加入脱氯的自来水或蒸馏水中，使其含菌量达到 5 ′ 104 cfu/100ml～5 ′ 105 cfu/100ml。 2.1.4.1.5? 试验菌污染水样中活菌的培养计数 ??? (1) 将纤维滤膜在蒸馏水中煮沸消毒 3 次，每次 15min。每次煮沸后需更换蒸馏水洗涤 2～3 次，以除去残留溶剂。 ??? (2) 将滤器用压力蒸汽灭菌( 121℃，20 min )，也可用酒精火焰灭菌。 ??? (3) 用无菌镊子夹取无菌的滤膜边缘，将粗燥面向上，贴放在已灭菌滤器的滤床上，稳妥地固定好滤器。取一定量待检水样(稀释或不稀释)注入滤器中，加盖，打开抽气阀门，在负压0.05 Mpa 下抽滤。 ??? (4) 水样滤完后，再抽气约 5s，关上滤器阀门，取下滤器。用无菌镊子夹取滤膜边缘，移放在品红亚硫酸钠琼脂培养基平板上，滤膜截留细菌面向上。滤膜应与琼脂培养基完全紧贴，当中不得留有气泡，然后将平板倒置，放入 37℃ 恒温培养箱内培养 22h～24h。 (5) 观察结果和计数:计数滤膜上生长带有金属光泽的黑紫色大肠杆菌菌落，并计算出染菌水样中含有的大肠杆菌数 (cfu/100ml )。 ? 2.1.4.1.6? 实验室杀菌试验操作程序 （1）饮水消毒剂杀菌试验 1）试验分组 ①试验组。申请消毒产品卫生许可批件时，按使用说明书规定的最短剂量，设定 1 个浓度，3 个作用时间（使用说明书规定的最短作用时间，最短作用时间的1.5倍和最短作用时间的0.5倍），测定其对大肠杆菌的杀菌效果。进行消毒产品监督检测时，按使用说明书规定的最短剂量，设定 1 个浓度，1 个作用时间（使用说明书规定的最短作用时间），测定其对大肠杆菌的杀菌效果。 ② 阳性对照组，以未经消毒的试验菌污染水样进行活菌培养计数; ③ 阴性对照组，以试验所用同批次未经使用的培养基进行培养，观察有无细菌生长。 2）操作程序 ①按 2.1.4.1.4所示方法配制试验菌污染水样。 ②将装有试验菌污染水样的三角烧瓶放入恒温水浴箱(20℃±2℃)中，开动磁力搅拌器，使细菌在水中分布均匀。先取2份试验菌污染水样，按2.1.4.1.5 所示方法进行大肠杆菌活菌计数(阳性对照组)。 ③待水样的温度恒定后加入消毒剂，迅速搅拌均匀。从开始加消毒剂起计时，按规定时间吸取水样，注入装有中和剂的无菌三角烧瓶中，以终止消毒作用。 ④将中和后水样，分别取 100 ml，10 ml，1 ml 各 2 份，按 2.1.4.1.5 所示方法进行大肠杆菌的活菌培养计数。 ⑤将未接种大肠杆菌的试验用同批培养基平板 2 个，置温箱中培养(阴性对照