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　 6）斑点试验 　　本法用于检测真菌毒素致突变试验的一种有意义的方法。主要利用沙门氏菌/微粒体突变性来检测某些样品种AFT的存在与含量。 　　A先将鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型变种的菌悬液，与一定量肝组织匀浆混合作倾注平板。 　　B待凝固后，再将一定量被检物(含AFT)加在平板中央待黄曲霉菌往外围琼脂中扩散时，围绕中心点将出现密布的回复突变的菌落。 　　本法作为一种生物学检验法广泛应用于开发安全、有用的化学物质和检测食品或农产品中黄曲霉菌。 2．免疫学方法 　　 黄曲霉菌是分子量为312～346的二氢呋喃香豆素的衍生物，无免疫原性，不能引起抗体的产生，故必须与大分子化学基团或蛋白质偶联，成为完全抗原，方能引起免疫动物的抗体形成，然后利用血清学方法检测AFT 　　由于黄曲霉菌的量一般都较低，因此，检测方法主要是敏感性较高的放射免疫测定法(RIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)。 烟曲霉菌可使鸡鸭鹅鸽及鹦鹉发生曲霉菌病或霉菌性肺炎。也可在发霉的饲料中产生毒素，一起家畜中毒。是曲霉菌属中致病性最强。 烟曲霉菌 烟曲霉菌分生子孢头 1.形态特征 孢子为圆形，呈蓝绿色，直径2.5~3.5um,呈连珠状排列。分生孢子柄长250~300um，分布在有隔板的纵横交织的气声菌丝上。 2.培养基特征 在沙氏培养基上初形成白色、圆形、绒毛状菌落，最后变成深绿色或者灰绿色。 3.致病性 可使鸡鸭鹅等曲霉菌病或霉菌性肺炎，在幼禽多呈急性经过；哺乳动物及人也可感染。在感染组织的过程中，还可产生一种蛋白毒素，可导致动物组织痉挛、麻痹、直至死亡。 4.微生物学检查 刮取少数肺脏病变等材料，置于玻片上，加一滴盐水，盖上盖玻片，置高倍镜下观察形态特征，分生孢子柄不分支，菌丝分支分隔，顶端膨大，以及小梗、分生孢子的形态、排列和色泽等。 Thank you~ * 四、曲霉菌属 曲霉菌属（Aspcrgillus）是丝孢目丛梗科的真菌。 分布：广泛，有些菌种可在食品、储粮和动物饲料中生长。 危害：引起粮食等的霉坏，而且还产生霉素，对人畜健康造成很大威胁。 概况 概况 菌丝分支分隔，接触培养基的菌丝分化出足细胞，其上生出直立的分生孢子柄，顶端膨大成球形顶囊，在顶囊处以辐射方式生出杆状小梗（一排或两排），顶端产生一连串分生孢子。　 分生孢子柄、顶囊、小梗和 分生孢子合成孢子头，可用于产生淀粉酶、蛋白酶和磷酸二酯酶等，也是酿造工业中的常见菌种。 分生孢子为单细胞，有黑、黄、白、绿等多种不同颜色，是鉴别不同菌种的依据。 米曲霉、酱油曲霉是常用发酵菌种。 黄曲霉、烟曲霉菌是常见禽畜致病菌。 黄曲霉菌也是地球的早期生命。 概况 造成感染的曲霉菌 详解 黄曲霉菌 烟曲霉菌 黄曲霉菌 分布广泛，常生长于花生仁及玉米、花生饼、棉籽饼和秸秆等 饲料上，还可以在各种食物及肉类制品上生长繁殖，并产生黄曲霉素散入各基质中，引起人畜中毒。 黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉产生的杂环化合物，它的代谢产物主要有B1、B2、G1、G2、M1和M2等类型。 显微镜下的黄曲霉 黄曲霉菌 1.形态特征 分生孢子梗多从基质部生出，长度小于1mm,壁厚无色粗糙。顶囊早起较长，晚期呈烧瓶形或近似球形，直径10~65mm。顶囊上产生小梗（单层或双层），小梗顶端着生分生孢子，孢子呈球形、近似橘形。 2.培养特征 可以培养于沙氏培养基、2%麦芽糖及7.5%氯化钠琼脂培养基上。生长温度为28~30°C ，相对湿度在80%以上。菌落生长较快。呈扁平状，也有褶皱呈脑回状。最初带黄色，后变黄绿色，老龄菌落呈暗色，反面带褐色或无色。 成份：蛋白胨、 水 、琼脂、葡萄糖或麦芽糖 制法：将上述物质称好，放入水中煮沸溶解分装包扎，高压后凝固备用。 用途：作分离培养霉菌用。 注意：1 接种临床新鲜标本可先加1-2滴70%酒精让干后再接种于含12．5%氯霉素沙氏斜面培养基上。 实验室条件下接种黄曲霉菌 3.致病性 黄曲霉菌的致病性主要是其所产生的毒素。在各类黄曲霉毒素中，黄曲霉毒素Ｂ1的毒性最大，其次是M1、G1、M2、B2和G2。因此，许多国家规定了黄曲霉毒素在食品中的极限值，即食品中的黄曲霉毒素含量不允许超过此值。 黄曲霉菌的毒性极强，远远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性，其中以B1毒性最大。当人摄入量大时，可发生急性中毒，出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄人，可造成慢性中毒，生长障碍，引起纤维性病变，致使纤维组织增生。AFT的致癌力也居首位，是目前已知最强致癌物之一。