《工具酶的发现和基因工程的诞生》教案2.docVIP

《工具酶的发现和基因工程的诞生》教案 【教学目标】 1、向学生解释限制性核酸内切酶和DNA连接酶的发现及其对基因工程诞生的意义。 2、阐明质粒的定义并解释其在基因工程中的作用。 【教学重难点】 1、通过认识“限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒作为转基因载体(质粒)的发现与应用”对于基因工程诞生的意义，体会科学技术发展的进程。 2、基因工程中三种基本工具的作用及特点。 【教学过程】 一、基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组技术和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 二、基因工程诞生的理论基础 (一)基因拼接的理论基础 1、DNA是生物的主要遗传物质。 2、DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。 3、双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构。 (二)外源基因在受体内表达的理论基础 1、基因是控制生物性状的独立遗传单位。 2、遗传信息的传递都遵循中心法则阐述的信息流动方向。 3、生物界共用一套遗传密码。(详见课题49) 三、基因工程的基本工具 (一)限制性核酸内切酶——分子手术刀 1、来源：主要从原核生物中分离。 2、功能：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 3、切割后的DNA末端：黏性末端。 (二)DNA连接酶——分子缝合针 1、功能：将切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子。 2、DNA连接酶与DNA聚合酶的比较 DNA连接酶 DNA聚合酶 作用实质 都是催化两个核苷酸之间形成磷酸二酯键 是否需模板 不需要 需要 连接DNA链 双链 单链 作用过程 在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 将单个核苷酸加到已存在的核酸 片段上，形成磷酸二酯键 作用结果 将存在的DNA片段连接成重组DNA分子 合成新的DNA分子 (三)运载体——分子运输车 1、条件：能在宿主细胞中保存下来并大量复制，有一个至多个限制性核酸内切酶切割点，有特殊的遗传标记基因，便于筛选。 2、种类：质粒(常用)、γ噬菌体的衍生物、动植物病毒。 3、质粒是能够自主复制的双链小型环状DNA分子。 4、作用：(1)作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内；(2)利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 【基础训练】1、切取某动物合成生长激素的基因，用某方法将此基因转移到鲇鱼的受精卵中，从而使鲇鱼比同类个体大了3～4倍，此项研究遵循的原理是( D ) 2、如图示一项重要生物技术的关键，字母X可能代表( C ) A、不能合成胰岛素的细菌 B、能合成抗体的人类细胞 C、能合成胰岛素的细菌 D、不能合成抗生素的人类细胞 3、如图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答： (1)在基因工程中，A→B为DNA扩增(PCR)技术，利用的原理是DNA复制，其中①为DNA解旋过程。 (2)加热至94℃的目的是使DNA中的氢键断裂，这一过程在细胞内是通过解旋酶的作用来完成的。 (3)当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板链延伸，最终合成两条DNA分子，此过程中原料是4种脱氧核苷酸，遵循的原则是碱基互补配对原则。 (4)目的基因导入绵羊受体细胞常用显微注射技术。 (5)B→D为抗虫棉的培育过程，其中④过程常用的方法是农杆菌转化法，要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体生物学水平上的鉴定过程：让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定性状。 【高考模拟】4、(2007广东生物7)现有一长度为1000碱基对(by)的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000by，用KpnI单独酶切得到400by和600by两种长度的DNA分子，用EcoRI、KpnI同时酶切后得到200by和600by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是( D ) 5、(2007全国卷Ⅱ4)下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是( C ) A、一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B、限制性内切酶的活性受温度影响 C、限制性内切酶能识别和切割RNA D、限制性内切酶可从原核生物中提取