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双向电泳的操作 2007-7-4 步骤 样品制备（Sample preparation） 固相pH 梯度胶条的水化（IPG strip rehydration） 第一向等电聚焦（IEF） 第一向胶条的平衡（ IPG strip equilibration） 第二向SDS 电泳（SDS） 检测染色（Detection/Staining） 蛋白点的挖取，收集 质谱分析 参考资料 /bbs 蛋白质组学导论生物学的新工具 (2005) D.C. 利布莱尔 著 蛋白质化学与蛋白质组学 (2004) 夏其昌 编著 一般性原则 尽可能的提高样品蛋白的溶解度，抽提最大量的总蛋白，减少蛋白质的损失 减少对蛋白质的人为修饰 破坏蛋白质与其他生物大分子的相互作用，并使蛋白质处于完全变性状态 样品制备需要的试剂 离液剂(chaotropes): 尿素（Urea）和硫脲（thiourea） 表面活性剂（sufactants）也称去垢剂： NP-40、TritonX -100 等非离子去垢剂 CHAPS 与Zwittergent 系列等双性离子去垢剂 还原剂（reducing agents ） 二硫苏糖醇（DTT） 二硫赤藓糖醇（DTE） 磷酸三丁酯（TBP） 选择性的加入 Tr