青霉素的提炼工艺.ppt

* * 青霉素的提炼工艺 刘科梅 1 青霉素的生产工艺过程 菌种 → 孢子制备 → 种子制备 → 发酵 → 发酵液预处理及种子加滤 → 提取 → 精制→ 成品检验 → 包装 → 分装 → （应用 → 跟踪 → 质量分析） 发酵阶段 提取阶段 2 发酵阶段 粉碎机 槽式混合机 3 青霉素提炼工艺流程 发酵液→ 预处理→ 过滤→ 萃取→ 洗涤→ 反萃取→共沸结晶→ 过滤→ 干燥→ 成品 3.1 预处理 青霉素的存在部位：发酵液 发酵液中含有大量杂质：菌体细胞、核酸、杂蛋白质、细胞壁多糖等、残留的培养基、色素、盐离子、代谢产物等 目的：浓缩目的产物，去除大部分杂质，改变发酵液的流变学特征，利于后续的分离纯化过程 预处理：发酵液加少量絮凝剂沉淀蛋白 发酵液的预处理和过滤 鼓式真空机过滤 一次滤液：Ph6.2-7.2,略浑浊，棕黄或绿色，蛋白质含量0.5-2.0% 3.2 过滤 过滤时转鼓下部沉浸在悬浮液中缓慢旋转。沉没在悬浮液内的滤室与真空系统连通，滤液被吸出过滤机，固体颗粒则被吸附在过滤面上形成滤渣。滤室随转鼓旋转离开悬浮液后，继续吸去滤渣中饱含的液体。当需要除去滤渣中残留的滤液时，可在滤室旋转到转鼓上部时喷洒洗涤水。这时滤室与另一真空系统接通，洗涤水透过滤渣层置换颗粒之间残存的滤液。滤液被吸入滤室，并单独排出，然后卸除已经吸干的滤渣。这时滤室与压缩空气系统连通，反吹滤布松动滤渣，再由刮刀刮下滤渣。压缩空气（或蒸汽）继续反吹滤布，可疏通孔隙，使之再生 . 板框式过滤机过滤： 硫酸调节ph4.5-5.0，加入0.07%溴代十五烷吡啶，0.07%硅藻土作为助滤剂。 二次滤液：澄清透明，用于提取（收率90%) 3.3 溶剂萃取 原理：青霉素游离酸易溶于有机溶剂，而青霉素盐易溶于水 萃取剂：青霉素分配系数高的有机溶剂。 工业上通常用：醋酸丁酯和醋酸戊酯。 由于第一次萃取时存在大量的蛋白质，所以要加0.05-0.1%乳化剂PPB。 萃取：2-3次。 萃取过程 BA萃取：酸化pH1.8-2.0，碟片式离心机分离（浓缩1.5-2.1） 反萃取：pH6.8-7.4(磷酸盐、碳酸盐缓冲液）。把青霉素从丁酯中提取到缓冲液中。 反复萃取2-3次，达到结晶要求。 萃取条件：为减少青霉素降解，整个萃取过程应保持在10℃下，萃取罐冷冻盐水冷却。 一次BA萃取 碟片式离心机 3.4 青霉素的精制 脱色 1、萃取液中添加活性炭，除去色素、热源质 2、过滤，除去活性炭 结晶 萃取液一般通过结晶提纯。青霉素钾盐在醋酸丁酯中溶解度很小，在二次丁酯萃取液中加入醋酸钾-乙醇溶液，青霉素钾盐就结晶析出。然后采用重结晶方法，进一步提高纯度，将钾盐溶于KOH溶液，调PH至中性，加无水乙醇，在真空条件下，共沸蒸馏结晶得纯品。 结晶-直接结晶 加醋酸钠-乙醇溶液反应：得到结晶钠盐。 加醋酸钠-乙醇溶液：得到青霉素钾盐。 结晶-共沸蒸馏结晶 萃取液，再用0.5M NaOH萃取pH6.4-6.8下得到钠盐水浓缩液。加3-4倍体积丁醇，16-26℃，真空0.67-1.3kpa下蒸馏。 水和丁醇形成共沸物而蒸出。钠盐结晶析出。结晶经过洗涤、干燥（60℃真空16h），磨粉，装桶，得到青霉素产品。 抽滤、洗涤、干燥 *