糖醇苷类发酵试验标准操作规程.doc

糖醇苷类发酵试验标准操作规程 1．目的 规范糖（醇、苷）类发酵试验标准操作规程。 2．原理 不同细菌含有发酵不同糖类的酶，分解糖的能力各不相同，产生的代谢产物也随细菌种类而异。观察细菌能分解各类单糖（葡萄糖等）、双糖（乳糖等）、多糖（淀粉等）和醇类（甘露醇）、糖苷（水杨苷等），是否产酸或产气。 3．试剂 3.1 成分 蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 溴甲酚紫指示剂 10ml 蒸馏水 1000ml 3.2 制备 将上述成分混合后，加热使其溶解。校正pH至7.1～7.2，用滤纸过滤；根据需要，分别加需要的糖和醇；分装于试管，每管内3ml，置高压灭菌器内，经115℃灭菌10分钟。置4℃左右冰箱备用。 4．质控 大肠埃希菌ATCC25922阳性（加葡萄糖、乳糖、甘露醇、蔗糖），奥斯陆莫拉菌ATCC25829阴性。 5.操作步骤 将纯培养的细菌接种至各种糖培养管中，置一定条件下孵育后取出，观察结果。 6.结果判断 若细菌能分解此种糖类产酸，则指示剂呈酸性变化；不能分解此种糖类，则培养基无变化。产气可使液体培养基中倒置的小管内出现气泡，或在半固体培养基内出现气泡或裂隙。 7.注意事项 糖发酵的基础培养基内必须不含有任何糖类何硝酸盐，以免出现假阳性反应。因有些细菌可使硝酸盐还原产生气体，而影响发酵糖类产气结果的观察。 8.临床意义 糖发酵试验是鉴定细菌的生化反应试验中最主要的试验，不同细菌可发酵不同的糖类。