经口急性毒性实验.pptVIP

急性经口毒性试验 急性毒性试验 实验动物的选择（物种和品系，年龄和体重，性别，分组，预检，禁食）(who?) 受试物（what?) 染毒方法(how?) 剂量选择（how?) 毒性作用观察(ending) 一 、实验目的 1.学习急性毒性试验的实验设计原则 2.掌握灌胃技术，随机分组方法 3.掌握LD50的计算方法 4.观察和描述受试物的中毒特征 5.掌握急性毒性分级标准 急性毒性作用： 指机体一次接触或24小时内多次接触化学物后在短期（最长到14天）内所发生的毒性效应，包括一般行为、外观改变、大体形态变化以及死亡效应。 LD50：半数致死剂量 指引起一组受试实验动物半数死亡的剂量。常用以表示急性毒性的大小。 其值越小，表示外源化学物的毒性越强；反之，毒性越低。 LD50是经过统计学计算得到的毒性参数，是一个统计量，受实验动物个体易感性差异的影响较小，因此是最重要的急性毒性参数。 二 、实验原理 选择健康的实验动物，根据体重按随机分组的方法，依据LD50计算的设计原则将动物分成数个染毒组。给予受试物后，了解动物所产生的急性毒性反应及其严重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因，观察受试物毒性反应与剂量的关系，求出半数致死剂量（LD50），并根据LD50值将受试物进行急性毒性分级。本次实验采用改进寇氏法。 改进寇氏法：利用剂量对数与死亡率呈S型曲线而设计的方法。要求如下： 每个染毒剂量组动物数相同， 各剂量组组距呈等比级数， 死亡率呈正态分布， 最低剂量组死亡率20％， 最高剂量组死亡率80%。 三、材料和试剂 1.实验动物：健康成年小鼠，昆明种，普通级，雌雄各60只 2.器材：灌胃针，注射器，吸管，容量瓶，滴管，动物体重秤等 3.试剂： 受试物为1.3g/ml敌敌畏油溶液（湖北荆州），植物油，苦味酸（染色标记）。 四、操作步骤 1.实验动物选择：昆明种小鼠，雌雄各60（上午） 2.实验动物的随机分组和标记（上午） 3.剂量设计及受试物配制（上午） 4.经口染毒（下午） 5.中毒体征和动物死亡情况观察记录（下午） 6.LD50的计算（次日下午） 7.结果评价、完成实习报告（次日下午）  雌雄分开分组，每种性别分6组，每组10只 1.动物称重：按体重分在不同笼中待分组 16g, 16g~, 18g~, 20g~, 22g~, 24g 2.随机分组方法 每种性别随机分为6组：A、B、C、D、E，F,每轮分别从笼中取一只动物按如下顺序到各组，直到动物取完。(雌雄分别分组） 第一轮：A、B、C、D、E、F 第二轮：B、C、D、E、F、A 第三轮：C、D、E、F、A、B 第四轮：D、E、F、A、B、C 第五轮：E、F、A、B、C、D 第六轮：F、A、B、C、D、E ...... 雌雄各5组为剂量组，各剩一组作为溶剂对照（只灌植物油）和备用。 分完组后在笼子上做好标记，动物暂不标记，下午灌胃前再标记。 实验动物的随机分组 剂量设计 预实验得出LD100、 LD0 ，各设置五个剂量组，n=5 i= ( lg LD100 - lg LD0)/ (n-1)， k=10i 雌性： LD100= 240mg/kg LD0= 90mg/kg 雄性： LD100= 250mg/kg LD0= 100mg/kg 改进寇氏法 1、 剂量设置：雌雄，等比数级，灌胃容量：0.1ml/10g 雌LD100=240mg/kg,LD0=90mg/kg,k=1.28 雄LD100=250mg/kg,LD0=100mg/kg,k=1.26 ㈠雌性5个剂量组 各组浓度 ㈡雄性5个剂量组 各组浓度 240mg/Kg 24mg/ml 250mg/kg 25mg/ml 187.5mg/Kg 18.8mg/ml 198.4mg/kg 19.8mg/ml 146.5mg/Kg 14.7mg/ml 157.4mg/kg 15.7mg/ml 114.4mg/Kg 11.4mg/ml 125.0mg/kg