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- 2019-09-23 发布于广东
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项目2:微生物发酵技术 任务2:工业培养基制备与灭菌 教学安排: 1. 员工培训 由老师讲解工业培养基理论基础。 分配实操任务:工业培养基的制备与灭菌。 2. 学生模拟组建运营一个培养基车间,撰写计划书(在理论教学期间完成)。 市场部:当前工业培养基的发展特点,培养基灭菌方法的技术进展。 技术部:确定工业培养基制备的技术路线,撰写操作规程。 品控部:制定工业培养基质量标准及检测方法。 总经理:协调监督各部工作,最后拿出完整的计划书。 3. 计划书实施。 计划书要先经过老师的审核,然后实施。 实施过程中考核操作技能。 实施后及时进行实训报告的撰写也总结。 一 培养基组成 1 培养基配方组成:组成成分、各组成成分的浓度、合适的pH; 2 培养基随微生物的生理与产物不同而不同; 3 培养基成分: (1)碳源:葡萄糖、淀粉; (2)氮源:碳酸铵、玉米浆; (3)无机盐和微量元素; (4)前体和诱导物。 二 培养基组成影响细胞分化和产物形成 细胞分化:细胞形态、生理功能和化学组成上彼此不同; 培养基组成影响细胞分化: 二价阳离子、阴离子聚合物、表面活性剂、固形物含量、各成分的浓度、培养液的pH。 例: 在碱性培养基中产黄青霉易形成球状体; 二价阳离子诱发细胞呈球形; 无素锰可通过改变黑曲霉菌细胞壁的成分; 生物素和青霉素能改变细胞膜的成分。 三 配制工业发酵培养基的一般要求 (1)组成丰富,浓度适当; (2)各成分之间彼此不反应; (3)粘度适当,具有适当的渗透压; (4)成分要有利于主产物的合成,不利于副产物的合成; (5)即不影响通气与搅拌,又不影响或稍微影响产物的分离精制和废物处理; (6)因地制宜,质优价廉,成本低。 第二节 培养基的成分 一 碳源 碳源:构成微生物细胞和代谢产物; 能源。 (一)糖类 单糖、双糖、多糖、淀粉质类和糖蜜; (二)脂肪 利用油脂增加微生物需氧量,产酸,降pH;要注意贮藏油脂,防止产生过氧化物。 (三)有机酸和醇; (四)碳氢化合物; 二 氮源 构成细胞成分,亦可作碳源使用。 (一)无机氮源的特点 1 成分单一,质量较稳定; 2 易被菌体吸收利用; 3 改变培养液的pH。 生理酸性物质与生理碱性物质。 (二)有机氮源的特点 1 成分比较复杂; 2 被菌体利用的速度不同; 速效氮源:玉米浆; 迟效氮源:黄豆饼粉和花生饼粉。 3 微生物对氨基酸的利用有选择性; 部分氨基酸即可用于菌体生长,亦可用于次级代谢产物的合成。 4 是引起发酵水平波动的主要因素。 常用有机氮源:黄豆饼粉、棉籽饼粉、麸质粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉等。 三 无机盐和微量元素 许多金属离子低浓度呈刺激作用,高浓度呈抑制作用。 1 磷 (1)组成生物大分子:核酸、核蛋白; (2)作为缓冲液调节pH; (3)对某些次级代谢产物有抑制作用。 常用磷酸盐:磷酸二氢钾、磷酸氢二钾及其钠盐。 2 硫 构成细胞生物分子。 常用化合物:硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵、硫代硫酸钠。 3 铁 是细胞色素C、细胞色素氧化酶和过氧化酶的组成元素,同时对许多产物合成有抑制作用。 常用化合物:硫酸铁。 4 锌、镁、钴 锌对部分抗生素合成有促进作用及操作菌体生长,过量则抑制。常用化合物:硫酸锌; 镁激活一些酶,能提高一些菌体对本身所产抗生素的耐受性。常用化合物:硫酸镁; 钴是维生素B12的元素之一。常用化合物:氯化钴。 5 钠、钾、钙 钠:细胞质细胞渗透压; 钾:影响细胞膜透性; 钙:调节细胞膜透性,控制pH。 四 水 功能: (1)溶剂与运输介质; (2)参与生化反应; (3)维持生物大分子稳定性; (4)传递热; (5)维持细胞形态; (6)控制酶的活性。 水的活度。 五 前体 在产物的生物合成过程,被菌体用于产物合成而自身结构无显著改变的物质。 内源性前体和外源性前体。 六 消泡剂 植物油、动物油和一些化学合成的高分子化合物。 七 其他成分 生长因子与诱导物。 第三节 培养基的种类与选择 一 培养基的种类 1 按培养基的组成分为合成培养基和复合培养基 合成培养基:由已知组成成分的各种营养物质组合的培养基; 复合培养基:由一些组成成分不完全明确的天然产
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