荧光蛋白上样缓冲液（SDS-PAGE）.PDFVIP

400-901-9800 sales@ support@ Pre-Staining Fluorescent Sample Loading Buffer for SDS 荧光蛋白上样缓冲液（SDS） 简介 荧光蛋白上样缓冲液在电泳前的样品处理阶段对 SDS的蛋白样品进行预染，标记上荧光。 实验完成以后，凝胶中或转膜后的蛋白条可直接通过紫外灯、LED 灯或其他数字成像系统进行观察和 分析，无需染色脱色。 荧光蛋白上样缓冲液灵敏度高比银染高。稳定性强，背景低。可对所有蛋白进行染色，不影响蛋白 的迁移率与电泳图谱。电泳过程中，游离的染料分子与溴酚蓝的迁移速率一致，跑胶结束时移至凝胶末 端，背景干净。荧光蛋白上样缓冲液非常适合用于追踪蛋白表达纯化以及 Western blot 的SDS。 编号： C05-03017 规格： 100ul 每个规格包含 3 管：Instant-Bands, Resuspension Buffer 和 Enhancing buffer。只有使用 Bis-tris 胶时才需要加 Enhancing Buffer. 保存方法：可于-20℃储存 12 个月，4℃储存 8 周，室温下储存 1 周。 使用步骤 1. 请在使用前根据管壁标签上的体积加入 resuspension buffer 重悬。Resuspension buffer 在 4℃可能 会有沉淀产生，室温下放置至沉淀消失。 2. 将用上样缓冲液处理的蛋白样品与待电泳蛋白样品 1:2 混合。比如，3ul 上样缓冲液+6ul 蛋白样品。 3. 90-100℃加热上述处理的样品混合液 5 分钟。细胞或组织样品，加热时间延长至 10 分钟。确保加热 温度90℃使样品充分受热。 大部分预制胶（Bis-Tris 体系除外）可以直接进行下一步。Bis-Tris 体系的预制胶(如 Life Technology)， 需加入20% 已处理样品体积的Enhancing buffer。比如，10ul 已处理的样品需加入2ul Enhancing buffer 。 4. 样品可以上样进行电泳了（无需再加 Loading Buffer 处理）。 5. 电泳结束后，将凝胶放至透射仪上进行观察和拍照。透射仪可以是紫外灯，蓝光LED 灯或其它凝胶 成像系统。如果光源在可见光波长范畴的无需剥胶，因为可见波长范围内的光可以穿透玻璃或塑料材质 的胶板。 6. （可选的）如果有需要，经荧光蛋白上样缓冲液处理的凝胶仍可进行考染。按标准的考染步骤进行 即可。 注意事项： 1. 请勿使用该上样缓冲液处理预染的或预处理的蛋白分子量标准。这些产品与荧光蛋白上样缓冲液不 兼容。 2. 灵敏度影响因素：高 pH （大于7）不会影响染色，低 pH 则会降低染色的效率，如果样品的 pH 低 于 5，建议将 pH 调整至 7 以上。 3. 荧光蛋白上样缓冲液不适合在如下 SDS实验中使用：切割蛋白条带用以测序、质谱分析或抗 体制备。 4. 建议-20℃保存，如果室温放置 2-3 周，则可添加新的 DTT，蛋白条带会重新变得清晰和明亮。添加 DTT 的终浓度不要超过20 mM 。也可以添加其他还原剂TCEP(2 mM)， 效果也很好。