细菌鉴定课件.pptVIP

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粪便培养菌落观察 沙门菌 与志贺菌 ▲沙门菌 : SS中心黑色之乳糖阴性菌落(亚利桑拉群可以为阳性), MC: 无色菌落 ▲志贺菌:SS、MC均为无色透明菌落 肠致泻性大肠埃希菌 ▲ O-157大肠埃希菌:SS:为红色乳糖阳性菌落,SMC为无色透明之山梨醇阴性菌落 ▲其他致病性大肠埃希菌多数为:SS、SMC均为红色 ▲其中肠侵袭型大肠埃希菌在SS上可能为无色菌落 弧菌 ▲霍乱弧菌:SS:无色菌落,TCBS:黄色大菌落 ▲其他弧菌:SS、TCBS均为无色或淡绿色菌落 气单胞菌 所有气单胞菌转种血琼脂均呈现β溶血 ▲嗜水气单胞菌,SS粉红色菌落,TCBS为黄色,SMC无色之大菌落 ▲其他气单胞菌:SS无色不透明菌落,TCBS为黄色,MC无色不透明大菌落 ▲邻单胞菌:SS、TCBS及MC均为无色透明菌落 ▲小肠结肠耶尔森菌:SS、MC为无色小菌落,SMC为红色牛眼状小菌落 特定标本菌落观察 尿液: ▲ J-K棒状杆菌:小而湿润,灰白/无色,半透明,生长慢; ▲支原体:固体培养基上,低倍镜或解剖显微镜下为典型“荷包蛋”样菌落 各种生殖道标本 ▲淋病奈瑟菌:在TM培养基上为灰/灰白半透明小菌落,非常湿润;在强化血琼脂上为灰白凸起,不溶血,有银色光泽1.0-2.0大小的菌落; ▲阴道加德纳尔菌:TM培养基上不生长,强化血琼脂上无色/灰白,细小,狭窄β溶血的菌落,生长缓慢,多数需48h才能形成明显小菌落。 脑脊液 ▲新型隐球菌:BA上为白色,24h为0.5~1.0mm左右大小圆形凸起菌落,不溶血,CHROMagar上生长缓慢,不显色或略微显蓝色。 ▲脑膜炎奈瑟菌:BA上为无色透明,凸起,1.0-1.5mm左右大小的露滴状菌落,Choc(营养强化,含奈瑟菌选择剂)上为灰色有银色光泽的,半透明,凸起,1.5mm左右大小的湿润菌落; 血、骨髓标本 ▲红斑丹毒丝菌:可形成两种菌落,光滑型细小、圆形突起、有光泽、易乳化;粗糙型菌落大,表面颗粒状、边缘如卷发样,微а溶血。 ▲乏养菌与颗粒链菌:在普通血琼脂或含血MHA上不生长,在金黄色葡萄球菌菌落周围具有典型的卫星现象。菌落灰白非常湿润,弱α-溶血或者不溶血。 定向试验——组合选择 MALDI-TOF指纹图谱 细菌鉴定试验、流程 与鉴定试验的基本组合 鉴定试验 试验流程 试验的选择与组合 鉴定试验 形态学观察 生化反应试验 血清学试验 分型试验 血清学分型 噬菌体分型(不常用) 细菌素分型(不常用) 动物试验(普通临床实验室不用) 形态学观察 镜下形态学观察: 不染色标本 暗视野动力观察 念珠菌孢子和菌丝的观察 丝状真菌小培养动态观察 L型菌落与特殊细菌菌落解剖结构 染色后镜下形态 Gram染色 抗酸染色 异染颗粒染色 荧光染料染色 荧光抗体染色 乳酸酚棉兰染色 墨汁染色 形态学观察 菌落形态观察: 大小(细如针尖、小、中等、大) 质地(坚硬、干燥、湿润、水滴状) 光滑程度(粗糙、光滑、粘液型) 凹凸(扁平、微凸、凸起、中性凹陷) 颜色(白色、灰色、黄色、绿色、红色、黑色等) 透明程度(透明、半透明、不透明) 边缘(整齐、星状、有伪足、枫叶状、树叶状等) 溶血性(α、β、γ) 其他、琼脂凹陷、气生菌丝、菌落背面颜色、菌落特殊气味等 形态学观察 营养需求(血琼脂、巧克力、营养琼脂生长情况) 胆盐耐受(麦康凯生长情况) 万古霉素耐受(含万古霉素巧克力生长情况) 液体培养基生长现象(菌膜、上半部生长、均匀浑浊、下半部生长、沉淀) 半固体动力现象(清晰、毛刷样、倒伞状) 生化反应 OF试验 各种糖发酵试验、糖氧化试验 糖衍生物发酵(α/β-甲基葡萄糖、β-葡萄糖胺、β-葡萄糖醛酸等) 淀粉、糖原水解 七叶苷水解 甲基红与VP试验 甘油复红 2-酮基葡萄糖酸盐还原试验 蛋白质代谢试验 明胶水解 石蕊牛乳液化(酪蛋白水解) 凝固血清液化(肽酶) 氨基酸水解试验 脱羧酶(精、鸟、赖) 脱氨酶(苯丙氨酸、色氨酸) 精氨酸双水解 尿素水解 吲哚产生 H2S产生 碳源、氮源利用试验 常用的有枸橼酸盐、醋酸盐、丙二酸盐、苹果酸盐(观察方法有同化和分解两种) 其他包括各种糖类、有机酸盐、各种氨基酸和胺类(只观察同化现象) 马尿酸水解试验 硝酸盐还原、产气试验 胆汁溶菌试验 拉丝试验 多糖合成试验 酶类试验 氧化酶 酚氧化酶 改良氧化酶 触酶 耐热触酶 Superoxol试验 凝固酶 DNA酶 玉米脂酶 吐温水解 卵磷脂酶 磷酸酶 链激酶 芳氨酶(肽酶) 吐温水解 糖苷酶(如OPNG) 各种芳氨酶及其检测底物 特殊诊断纸片鉴定法 Optochin敏感试验 杆菌肽敏感试验 复方新诺明敏感试验 O129敏感试验 新生霉素敏感试验 溶菌酶敏感试验 生长以及生长抑制试验 KCN抑制试验

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