第六章 微生物的生长与控制.pptVIP

（四）冷冻保藏 1．普通冷冻保藏技术 2．超低温冷冻保藏技术 3．液氮冷冻保藏技术 （五）冷冻真空干燥保藏法 冷冻真空干燥保藏法又称冷冻干燥保藏法，简称冻干法。 它通常是用保护剂制备拟保藏菌种的细胞悬液或孢子悬液于安瓿管中，再在低温下快速将含菌样冻结，并减压抽真空，使水升华将样品脱水干燥，形成完全干燥的固体菌块。并在真空条件下立即融封，造成无氧真空环境，最后置于低温下，使微生物处于休眠状态，而得以长期保藏。 常用的保护剂有脱脂牛奶、血清、淀粉、葡聚糖等高分子物质。 由于此法存活率高，变异率低，是目前被广泛采用的一种较理想的保藏方法。但该法操作比较烦琐，技术要求较高，且需要冻干机等设备。 （一）菌种的退化 菌种退化是指由于自发突变而使某物种原有的一系列生物学性状发生量变或质变的现象。 1．菌种退化的现象 菌种衰退的具体表现有以下几个方面： （1）菌落和细胞形态改变。 （2）生长速度缓慢，产孢子越来越少。 （3）代谢产物生产能力的下降，即出现负突变。 （4）致病菌对宿主侵染能力下降。 （5）对外界不良条件抵抗能力的下降等。 二、菌种的退化与复壮 2．菌种退化的原因 （1）基因突变 （2）连续传代 （3）不适宜的培养和保藏条件 （4）长期低温保藏? 3．防止菌种衰退的措施 （1）控制传代次数 （2）创造良好的培养条件 （3）利用不易退化的细胞移种传代 （4）采用有效的菌种保藏方法 （5）定期进行分离纯化 （二）菌种的复壮 退化菌种的复壮可通过纯种分离和性能测定等方法来实现，其中一种方法是从退化菌种的群体中找出少数尚未退化的个体，以达到恢复菌种的原有典型性状。另一种方法是在菌种的生产性能尚未退化前就经常有意识地进行纯种分离和生产性能的测定工作，以达到菌种的生产性能逐步提高。所以这些方法实际上是一种利用自发突变不断从生产中进行选种的工作。具体的菌种的复壮措施如下： 1．纯种分离法 2．宿主体内复壮法 3．淘汰法 4．遗传育种法 【本章小结】 微生物的生长是一个复杂的生命活动过程，它包括个体生长和群体生长两个层面。研究微生物的生长状况不仅要看个体细胞质量的增加，同时要看群体细胞数目的增加，由于研究微生物个体的生长有一定的困难，因此研究微生物的生长一般研究其群体生长。微生物的生长受物理因素和化学因素的影响，掌握微生物的生长规律和环境条件对微生物的影响，对于利用微生物有着十分重要的指导意义。 菌种是一个国家的重要自然资源，菌种选育是微生物学研究的一项基础工作，诱变育种、原生质体融合育种和基因工程育种是微生物育种常用的基本方法，其中诱变育种是最常用的工业育种技术。优良的菌种来之不易，是珍贵的财富，防止菌种的退化以及对菌种进行复壮和保藏是微生物遗传育种的基础，也是微生物实验的基本操作。 （三）表面活性剂 能降低表面张力的物质称为表面活性剂，这类物质加入到培养基中，可影响细胞的生长与分裂。 表面活性剂能聚集在菌体表面，引起菌膜损伤并和菌体蛋白作用表现出杀菌能力。 胆汁、胆盐、肥皂、洗衣粉都是表面活性剂，还有一些人工合成的阳离子表面活性剂如洗必泰、新洁尔灭。 （四）化学治疗剂 化学治疗剂是一类能选择性的抑制或杀死人畜和家禽体内的病原微生物并可用于临床治疗的特殊化学药剂。 化学治疗剂与杀菌剂或抑菌剂不同，可以内用。化学治疗剂主要有抗代谢物和抗生素。 1．抗代谢物 在微生物生长过程中常常需要一些嘌呤、嘧啶、叶酸以及氨基酸等生长因子才能正常生长，可以利用生长因子的结构类似物干扰微生物的正常代谢，以达到抑制微生物生长的目的。此类生长因子的结构类似物又称为抗代谢物。 抗代谢物种类 次黄嘌呤类似物主要是6-巯基嘌呤 嘧啶类似物主要有5-氟尿嘧啶FdUMP与dUMP（磷酸脱氧核糖尿嘧啶核苷） 氨基酸类似物有氮杂丝氨酸 叶酸类似物有氨基蝶呤和氨甲蝶呤 2．抗生素 抗生素是另一类重要的化学治疗剂，是微生物或某些高等动植物在生命活动过程中产生的具有抗病原体或其它活性的一类代谢物，以及用化学方法合成或半合成的化合物，具有低浓度时就可抑制或杀死微生物的作用，是临床上经常使用的重要药物。 抗生素杀菌作用主要有4种机制： （1）抑制细胞壁的形成； （2）影响细胞膜的功能； （3）干扰蛋白质的合成； （4）阻碍核酸的合成。 三、工业上常用的微生物培养技术 工业上常用的微生物培养技术主要有分批培养、连续培养和补料分批培养。 （一）分批培养 在一个相对独立密闭的系统中，一次性投入培养基对微生物进行接种培养的方式一般称为分批培养。由于它的培养系统的相对密闭性，故分批培养也叫密闭培养。由于它的相对简单与操作方便，在微生物学研究与发酵工业生产实践中仍被广泛采用。 （二）连续培养 若将新鲜的培养基连续加入均匀搅拌的培养物中，同时排出含有细胞和发酵