发酵过程控制2.ppt

第八节 溶解氧对发酵的影响 氧是一种难溶于水的气体。在25℃，1×105Pa条件下，纯氧在水中的溶解度为1.26mmol/L，空气中的氧在纯水中的溶解度更低（0.25mmol/L）。在28℃氧在在发酵液中的溶解度只有0.22 mmol/L，而发酵液中的大量微生物耗氧迅速（耗氧速率大于25~100 mmol/L.h），因此，供氧对于好氧微生物来说是非常重要的。在对数生长期，即使发酵液被空气饱和，若此时停止供氧，发酵液中溶氧可在几分钟之内便耗尽。 在好氧深层培养中，氧气的供应往往是发酵能否成功的重要限制因素之一。 好氧微生物的生长和代谢活动都需要消耗氧气，它们只有在氧分子存在的情况下才能完成生物氧化作用。 液体中的微生物只能利用溶解氧，气液界面处的微生物还能利用气相中的氧。 　 强化气液界面也将有利于供氧。 在微生物的培养过程中，应保持供氧与耗氧的平衡，满足微生物对氧的利用。 举例： 谷氨酸和红霉素发酵前期，菌大量繁殖，需氧量不断增大，需溶氧浓度下降，出现一个低峰，菌的摄氧率、菌浓、黏度也同时出现一个高峰。这都说明产生菌正处在对数生长期。 过了生长阶段，需氧量有所减少，溶氧经过一段时间的平稳阶段（如谷氨酸发酵）或随之上升（如抗生素发酵）后，就开始形成产物，溶氧也不断上升。 谷氨酸发酵的溶氧低峰在６～２０ｈ，而抗生素的溶氧低峰在１０～７０ｈ，低峰出现的时间和低峰溶氧随菌种、工艺条件和设备供氧能力的不同而异。 发酵中后期，对于分批发酵来说，溶氧变化比较小。 在生产后期，由于菌体衰老，呼吸强度减弱，溶氧也会逐步上升，一旦菌体自溶，溶氧更会明显上升。 补料对溶氧的影响： 当外界进行补料（包括碳源、前体、消沫油）时，则溶氧发生改变，其变化大小和持续时间的长短随补料时的菌龄、补入物质的种类和剂量不同而不同。 如补加糖后，发酵液的摄氧率增加，引起溶氧下降，经过一段时间后又逐步回升；继续补糖，甚至降至临界氧浓度以下，因而成为生产上的限制因素。 溶解氧异常 在发酵过程中，有时出现溶氧明显降低或明显升高的异常变化，常见的是溶氧下降。 造成异常变化的原因有两方面：耗氧或供氧出现了异常或发生了障碍。 从溶解氧浓度的变化，可以了解微生物生长代谢是否正常，工艺控制是否合理，设备供氧能力是否充足，查出发酵不正常的原因，控制好发酵生产。 引起溶氧异常下降的原因： ① 污染好气性杂菌。 ② 菌体代谢发生异常，需氧量增加，使溶氧下降。 ③ 设备或工艺控制发生故障或变化， 例如：a 搅拌功率消耗变小或搅拌速度变慢； b 消泡剂因自动加油器失灵或人为加入量太多； c 停止搅拌、闷罐（罐排气封闭）等。 引起溶氧异常升高的原因 在供氧条件没有发生变化的情况下，主要是耗氧出现改变，如菌体代谢出现异常，耗氧能力下降，使溶氧上升。 特别是污染烈性噬菌体，影响最为明显，产生菌尚未裂解前，呼吸已受到抑制，溶氧有可能上升，直到菌体破裂后，完全失去呼吸能力，溶氧就直线上升。 b、消泡剂能破坏膜弹性而导致气泡破灭 稳泡因素中谈到，因泡膜表面吸附表面活性剂具有弹性，当受到外部压力时有自愈作用。消泡剂能破坏泡膜的这种弹性。离子型表面活性剂水溶液产生的泡沫，是因为表面活性剂定向排列形成双电层，借助排斥作用阻碍泡沫合并而使泡沫稳定。 这种性质的泡沫，只需向体系中加入一种离子电荷相反的表面活性剂，甚至本身也是助泡剂，就可降低泡沫稳定性。这是因为两种表面活性剂彼此干扰，妨碍在气液界面上定向排列，破坏了膜弹性，因而产生消泡作用。 C、消泡剂能促使液膜排液，因而导致气泡破灭 泡沫液厚泡沫弹性好，自愈效应强；泡膜排液速率反映泡沫的稳定性。起泡体系的粘度越高，排液速度越低，如蛋白质溶液，肽链之间能够形成氢键；有些表面活性剂能与水分子形成氢键，能减少泡沫中的排液，起到稳泡作用。 加入不产生氢键的表面活性剂，取代产生氢键的表面活性剂，就可以使排液加快。 d 表面活性剂吸附层与泡膜上两吸附层当中的泡膜液之间亲和力的强弱； 表面活性剂的HLB值反映这种亲和性，高HLB的表面活性剂，亲水性强，易于使吸附层之间的水随着迁移，是稳泡剂；低HLB值的表面活性剂，亲水性弱，不易使吸附层之间的水随着迁移，往往是消泡剂。 亲水性弱的低HLB值的表面活性剂能使泡膜吸附层之间的水不随吸附层迁移，从而促进泡膜排液，起到消泡作用 破泡剂与抑泡剂的区别 （1）消泡剂可分为破泡剂和抑泡剂 破泡剂：是加到已形成的泡沫中，使泡沫破灭的添加剂。如低级醇、天然油脂。一般来说，破泡剂都是其分子的亲