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实验性肾衰竭 急 性 肾 功 能 不 全 （Acute Renal insufficiency, ARI） 各种病因引起双侧肾脏在短期内泌尿功能急剧降低，导致机体内环境出现严重紊乱的病理生理过程。 了解实验性肾功能不全动物模型复制方法 观察升汞中毒家兔的一般状态，尿的变化、血浆尿素氮水平以及肾脏大体形态改变 根据实验指标，分析讨论急性肾功能不全的病理生理变化 实 验 目 的 实验动物及模型复制的原理 原 理 肾毒物HgCl2 引起家兔肾小管变性、坏死，导致严重的肾脏功能不全。 观 察 指 标 临床变化 对象 手术操作 指 标 GFR下降、尿量下降 尿液 膀胱插管 尿量 尿成分改变 蛋白尿、血尿和管型 氮质血症 血液 颈动脉插管 血浆尿素氮水平 肾脏形态改变 肾脏 兔尸体解剖 肾脏色泽、体积、皮质条纹等 与对照家兔做比较： 实 验 步 骤 1. 复制模型（已完成） 实验组 HgCl2 肌肉注射1.2ml/Kg 24h 对照组 NaCl 肌肉注射1.2ml/Kg 24h (1) 称重麻醉: 腹腔注射20%乌拉坦，5ml/kg 2. 手术及操作 剑突 耻骨联合 部位：左下腹近腹中线1cm 方法：与腹壁呈45°进针，进入腹腔有落空感，回抽无血、肠内容物，缓慢推注 效果判断：肌肉松弛，自然卧倒，眼睑反射迟钝，钳夹皮肤无反应等 （2）固定备皮： 固定： 备皮： 颈部正中：甲状软骨- 胸骨上缘 下腹正中：耻骨联合上1～5cm （3）膀胱插管收集尿液 下腹部切口，分离组织，暴露膀胱 注射器抽膀胱内尿3ml(备用) 荷包缝合（膀胱无血管区） 膀胱插管 C 左颈总动脉 迷走神经 颈内静脉 胸骨舌骨肌 胸锁乳突肌 （4）左颈总动脉插管 分离 抗凝 耳缘静脉 肝素(1ml/kg) 插管 左颈总动脉插管 3.远心端，45o剪口，约为管径的1/2 4.朝心脏方向插管 2~3cm并固定 颈 总 动 脉 1.结扎远心端 1 2.夹闭近心端 2 近心端 心脏 远心端 头部 （5）尿液镜检，计录管型数和细胞数（10个视野） 管型 （低倍镜） 细胞 （高倍镜） （6）尿蛋白定性检查 取尿液3ml于试管中 酒精灯上加热至沸腾 若混浊，加入5%醋酸3-5滴 再煮沸 尿变清，尿内有尿酸盐 混浊加重，尿中有蛋白 程度 等级 蛋白含量（g%） 清晰 －　 0.01 轻度白色浑浊 ＋ 0.01~0.05 乳样浑浊　 ＋ ＋ 0.05~0.2 浑浊或少量碎片 ＋＋＋ 0.2~0.5 絮状浑浊 ＋＋＋＋ 0.5 （6）尿蛋白定性检查 （7）血浆尿素氮测定 原理：血液中尿素在强酸条件下与二乙酰-肟和氨硫脲（DAM-TSC）共煮沸，生成红色复合物，颜色深浅与尿素氮含量成正比例关系，用分光光度计测定OD值，可计算出尿素氮含量。 方法 ① 每组自颈总动脉取血10ml到离心管,离心,3000rpm 10min,吸出上层血浆置于干净试管中备用； ② 按下表加入试剂： 试剂（ml） 空白管 标准管 测定管(ABCD) 血浆 - - 0.02 水 0.5 0.1 0.5 尿素氮标准液Ⅱ - 0.4 - DAM-TSC 0.5 0.5 0.5 酸混合液 4.0 4.0 4.0 ③ 各管加好混匀后置沸水锅中煮沸10min，流水中冷却3min后测OD值（520nm波长）,先以空白管调零，再读取测定管值； ④ 计算： 测定管光密度(Du) 标准管光密度(Ds) ×0.002× 100 0.02 = Du Ds ×10 血浆尿素氮(mg%)= （8）形态学观察 ①将家兔处死（耳缘静脉注入空气5~10ml）,取出肾脏； ②观察并比较两组家兔肾脏的大体形态，如体积大小，表面色泽，皮质条纹及色泽等。 实 验 流 程 概 括 1. 复制模型（已完成） (1) 称重麻醉: 腹腔注射20%乌拉坦，5ml/kg 2. 手术操作及检测指标 (2) 固定备皮： (3) 膀胱插管收集尿液 (4) 左颈总动脉插管 (5) 尿液镜检，计录管型数和细胞数（ 10个视野） (6) 尿蛋白定性检查 (7) 血浆尿素氮测定 实验报告的书写 实验目的 实验步骤（简明扼要） 实验结果 实验项目 中毒家兔 对照家兔 尿液检查 尿液镜检 尿蛋白检查 尿量 血浆尿素氮测定 肾脏大体形态 分析讨论 * * 右手执剪刀，左手绷紧皮肤，剪刀