原肌球蛋白4通过慢病毒重组体技术应用于脊髓损伤后的作用及机制研究：随机对照实验方案.docVIP

www.CRTER www.CRTER.org 罗夙医，等. 原肌球蛋白4通过慢病毒重组体技术应用于脊髓损伤后的作用及机制研究：随机对照实验方案 www.CRTER www.CRTER.org 罗夙医，等. 原肌球蛋白4通过慢病毒重组体技术应用于脊髓损伤后的作用及机制研究：随机对照实验方案 PAGE 5578 P.O. Box 10002 PAGE 3 P.O.Box 1200, 中国组织工程研究 第20卷 第37期 2016–09–09出版 www.CRTER.orgChinese Journal of Tissue Engineering Research September 9, 2016 Vol.20, No.37 www.CRTER.org · ·研究原著· PAGE 5573 ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH 原肌球蛋白4通过慢病毒重组体技术应用于脊髓损伤后的作用及 机制研究：随机对照实验方案 罗夙医1，黄 薇2，王 晶3，王玺赟4，李劲涛3 (昆明医科大学，1病原生物学与免疫学系，3神经科学研究所，42012级麻醉专业，云南省昆明市呈贡新区 650500；2云南省第三人民医院神经内科，云南省昆明市 650011) 引用本文：罗夙医，黄薇，王晶，王玺赟，李劲涛. 原肌球蛋白4通过慢病毒重组体技术应用于脊髓损伤后的作用及机制研究：随机对照实验方案[J].中国组织工程研究，2016，20(37):5573-5579. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.37.015 ORCID: 0000-0002-1661-9305(罗夙医) 文章快速阅读： 慢病毒重组体技术敲除原肌球蛋白4对脊髓全横断大鼠神经行为学变化及其对轴突外生作用的机制 慢病毒重组体技术敲除原肌球蛋白4对脊髓全横断大鼠神经行为学变化及其对轴突外生作用的机制 罗夙医， 罗夙医，女，1983年生，云南省昭通市人，汉族，2012年大理大学毕业，硕士，助教，主要从事微生物免疫研究。 通讯作者：李劲涛，博士，副教授，昆明医科大学神经科学研究所，云南省昆明市 650000 中图分类号:R318 文献标识码:B 文章编号:2095-4344 (2016)37-05573-07 稿件接受：2016-07-26 BBB评分评估大鼠运动功能恢复 BBB评分评估大鼠运动功能恢复 基于体外慢病毒重组体技术方法敲除TPM4转染脊髓神经元脊髓全横断大鼠 基于体外慢病毒重组体技术方法敲除TPM4 转染脊髓神经元 脊髓全横断大鼠 应用LEICA DMI6000B获得细胞影像检测细胞轴突长度 应用LEICA DMI6000B获得细胞影像检测细胞轴突长度 文题释义： 原肌球蛋白：相对分子质量为64 000，以大量异构体形式广泛分布于各种真核细胞中，最常见于骨骼肌细胞内，是肌动蛋白结合蛋白的一种。原肌球蛋白与肌动蛋白结合，位于肌动蛋白双螺旋的沟中，主要作用是加强和稳定肌动蛋白丝，抑制肌动蛋白和肌球蛋白结合，哺乳动物中的4个原肌球蛋白基因已被确认，分别命名为TPM1，TPM2，TPM3，TPM4。 原肌球蛋白4(TPM4)的功能：TPM4有稳定F-肌动纤维的作用，在肌肉收缩的调节中发挥重要的作用。此外，TPM4作为一种仅次于其它细胞骨架肌动蛋白的一种有趣的候选蛋白，可在未成熟的神经元中调节转录，并与肌肉相关。TPM4的表达也在肿瘤中和神经系统被发现，不仅如此，据报道TPM4与神经轴突的生长和突触可塑性相关。 摘要 背景：前期研究采用2-DE/MALDI-TOF/MS方法，发现原肌球蛋白4在脊髓表达增加，但迄今为止，有关原肌球蛋白4与脊髓损伤的发病机制和进展的关系仍知之甚少。 方法/设计：①随机对照动物实验：建立脊髓全横断损伤大鼠模型，通过2-DE双向电泳、氨基酸系列分析、q-PCR和Western-Blot方法明确脊髓横断损伤3-28 d在损伤脊髓头侧原肌球蛋白4的表达变化。②基因水平的机制探索实验：用基于体外慢病毒重组体技术敲除原肌球蛋白4，研究其对体外培养的脊髓神经元树突生长长度的作用；并通过BBB评分法评估原肌球蛋白4敲除对脊髓横断损伤大鼠运动功能恢复的作用。 讨论：实验结果拟为脊髓横断损伤后促进运动功能恢复的治疗提供一种基于慢病毒重组体为载体携带原肌球蛋白4干扰RNA的、新的、有效的分子治疗策略，并阐明其治疗作用机制，为临床脊髓全横断损伤的基因治疗开辟乐观的应用前景。 伦理批准：研究经昆明医科大学医学伦理委员会批准，大鼠的外科操作和