核酸类药物的分析课件.ppt

核酸类药物的分析;基本要求;第一节 概述;什么是核酸？;核酸; ;核苷酸;;核苷酸;戊糖;核苷;DNA RNA;;类别;稀有碱基;鸟嘌呤;二、理化性质;（四）变性和复性 1.变性：在某些理化因素影响下，DNA双螺旋区的氢键断裂和碱基堆积力破坏，有规律的双螺旋结构变成单链无规律的“线团”，但不发生共价键的断裂，这过程称之。 变性原因：高温（一般＞75℃）、强氧化剂、强酸、碱、尿素等； 机理：双链间氢键断开，成为两条单链（ DNA双螺旋二级结构的破坏，生物活性的丧失） 特征性Tm---DNA的变性温度 82~95℃;2.复性 一定条件下，去除变性因素后，核酸恢复二级结构及生物活性的现象；通常使用热复性。（退火）;（五）颜色反应 苔黑酚反应: RNA中核糖+浓HCl（浓H2SO4）→糠醛+苔黑酚→深绿色化合物（ λmax=670nm ） 二苯胺反应: DNA中脱氧核糖+浓H2SO4 →5-羟基-4-羰基戊醛+二苯胺→蓝色化合物（ λmax=595nm ） 水解后磷酸： 磷酸+钼酸→磷钼酸+还原剂（维生素C、氯化亚锡等） →钼蓝（ λmax=660nm ） ;第二节 嘌呤类核苷酸药物分析;一、鉴别;（一）戊糖的鉴别;（二）嘌呤的鉴别;（三）磷酸的鉴别;（四）特征吸收光谱;（五）熔点测定;二、检查;三、含量测定;四、实例分析;（一）肌苷的质量分析;3.鉴别 取0.01％供试品溶液适量,加等体积的3,5-二羟基甲苯溶液(取3，5-二羟基甲苯与三氯化铁各0.1g，加盐酸使成100ml)，混匀，在水浴中加热约10分钟，即显绿色。---苔黑酚反应 取本品1％水溶液，加氨制硝酸银试液数滴，即产生白色胶状沉淀。---嘌呤碱基 取含量测定项下的溶液,照分光光度法测定，在248nm的波长处有最大吸收，在222nm的波长处有最小吸收。 色谱图 IR;4.检查　 溶液的澄清度与颜色（溶液的透光率）　取本品0.5g，加水50ml使溶解，照分光光度法在430nm的波长处测定透光率，不得低于98.0％(供注射用)。 干燥失重　取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过1.0 炽灼残渣　不得过0.1％(供注射用),或不得过0.2％(供口服用 重金属　取本品1.0g，依法检查含重金属不得过百万分之十。 次黄嘌呤　①精密称取本品0.5g，置50ml量瓶中, 加水溶解并稀释至刻度，摇匀，照纸色谱法试验，吸取上???溶10μl，点于3×25cm色谱滤纸上，照上行法，以水为展开剂，展开约20cm处，取出晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，不得出现杂质斑点。 ②HPLC;5.含量测定　 1）UV法：取本品，精密称定，加水制成每1ml中约含10μg的溶液，照分光光度法在248nm的波长处测定吸收度，按C10H12N4O5的吸收系数（E1％1cm）为460计算。 2）HPLC;6.作用与用途　辅酶类药。有改善机体代谢作用。用于各种类型肝脏疾患、心脏疾患、白细胞减少症、血小板减少症、中心视网膜炎、视神经萎缩等。 7.用法与用量口服，一次0.2～0.6g一日0.6～1.8g 8.贮藏　遮光，密闭保存。 9.制剂(1)肌苷口服溶液　(2)肌苷片　(3)肌苷注射液 (4)肌苷胶囊(5)肌苷颗粒剂;（二）三磷酸腺苷二钠（ATP）的质量分析;2.性状：本品为白色或类白色粉末或结晶块状物；无臭，味咸；有引湿性。 本品在水中易溶，在乙醇、氯仿或乙醚中几乎不溶。 ;3.鉴别 （1）取本品20mg,加稀硝酸2ml溶解后，加钼酸铵试液1ml，加热，放冷，即析出黄色沉淀。---磷酸盐 （2）取本品约10mg，加盐酸溶液(1→2)5ml溶解后，加间苯三酚10mg，混匀，置水浴中加热约1分钟，即显玫瑰红色。--戊糖 （3）苔黑酚反应—戊糖 （3）UV （4）IR （5）本品的水溶液显钠盐的鉴别反应;4.检查 酸度　 溶液的澄清度与颜色　 蛋白质　取本品20mg，加水2ml溶解后，滴加30％磺基水杨酸溶液0.5ml，不得发生浑浊。 有关物质 水分　 氯化物 铁盐 重金属　 热原　;5.含量测定　 （1）总核苷酸：UV （2）三磷酸腺苷二钠的重量比：HPLC （3）色谱条件与系统适用性试验 （4）测定法;6.作用与用途　辅酶类药。用于进行性肌萎缩、脑溢血后遗症、心功能不全、心肌疾患及肝炎等。 7.注意　缓慢注射。心肌硬塞和脑溢血在发病期患者慎用。 8.贮藏　有阴凉干燥处密封保存。有效期１年。 9.制剂　(1)三磷酸腺苷二钠注射液　(2)注射用三磷酸腺苷二钠 ;第三节 嘧啶类核苷酸药物的分析;一、鉴别;二、检查;三、含量测定;四、实例分析---氟尿嘧啶;2.性状：;3.鉴别 （1）+溴，溴褪色；+氢氧化钡，紫色↓ （2）三氧化铬的饱和硫酸溶液，均匀涂于管壁