试论高效液相色谱分析技术的应用.docVIP

PAGE PAGE 1 试论高效液相色谱分析技术的应用 　　【摘要】HPLC在我国食品分析领域的应用始于20世纪70年代末，90年代后期国家标准中开始将HPLC法列为检测食品中的污染物、营养成分、添加剂、毒素和无机成分等的国标方法。 　　【关键词】HPLC；高效液相色谱分析；食品检测 　　1.HPLC在食品添加剂领域的应用 　　1.1食品甜味剂的检测 　　采用液相色谱—气相色谱联用技术，SpherigelC18色谱柱，电喷雾负离子采集模式，甲醇-甲酸-三乙胺缓冲盐梯度洗脱，定量测定果冻等食品中安赛蜜、糖精钠和甜蜜素含量，结果加样回收率为93.19%～100.90%，相关标准偏差（RSD）为1.05%～2.04%。该方法选择性好，定性定量准确，分析时间短，同时也适用于饮料等其他食品的定性定量检测。 　　用高效液相色谱—荧光法（HPLC-FLD）测定食品中的糖精钠，最低检出限在0.005～0.200mg/ml，与高效液相色谱—紫外检测法（HPLC-UV）相比较，HPLC-FLD法重现性好，准确度更高，由于FLD的选择性响应，降低了对色谱柱的性能要求，更适合复杂样品的快速分析，使其具有比UV法更高的可靠性，是一种较为理想的糖精钠检测方法。 　　1.2食品防腐剂的检测 　　利用HPLC测定含乳饮料中苯甲酸的含量。用Zn（Ac）2和KFe（CN）3溶液作为沉淀剂进行样品的预处理，磷酸盐缓冲液和甲醇混合溶液为流动相，C18色谱柱，于波长225nm处紫外检测，方法简单快速、灵敏度高，既适用于大部分含乳饮料，也适用于纯牛奶的测定。苏爱梅采用加沉淀剂沉淀法对火腿肠样品进行预处理，过滤后用RP-HPLC法测定火腿肠中防腐剂苯甲酸和山梨酸的含量。色谱柱为Symetry-C18，以0.02mol/L乙酸铵-甲醇（97∶3）为流动相，检测波长为230nm。苯甲酸和山梨酸浓度在0～0.05g/L范围内线性很好（r=0.9996）；山梨酸最低检出限为0.024g/L，平均回收率为100.4%，RSD为0.68%。 　　1.3食品色素的检测 　　采用HPLC法测定保健食品黄金搭档包衣片中食用合成色素，样品前处理用粉碎提取法和漂洗法，聚酰胺吸附纯化LichrospherC18柱，甲醇-乙酸铵流动相梯度洗脱，单波长或多波长测定柠檬黄、靛蓝和诱惑红3种色素。其线性范围宽（0～100g/ml），回收率高（91.3%～103.1%），重现性好（RSD=2.11%～5.63%），最低检出限为2～11ng。其中，尤以粉碎提取法，梯度洗脱，多波长检测效果更佳。 　　1.4食品抗氧化剂的检测 　　采用RP-HPLC法测定油炸薯条没食子酸内酯（PG）、叔丁基对苯二酚（TBHQ）、羟基茴香醚（BHA）、4-已基间苯二酚（4HR）、二丁基羟基甲苯和2246含量。其中，PG、TBHQ用50%甲醇（RP-HPLC体积分数1%的冰醋酸）作流动相，BHA、4HR、BHT和2246用80%甲醇作流动相，检测波长为280nm，相关系数在0.9983～0.9996，最低检出限为1.0～2.0μg/g，平均回收率均在85%以上。 　　采用基质固相分散萃取植物油中抗氧化剂BHA、BHT、TBHQ和PG，经HPLC法进行分离。结果通过基质固相分散技术，可减少有机溶剂的用量，缩短分析时间，提高分析效率，回收率为85.8%～94.3%，最低检出限为2ng。 　　2.HPLC在食品营养成分领域的应用 　　2.1碳水化合物的检测 　　对于碳水化合物的测定，HPLC法操作简便，灵敏度高，可同时测定各种糖，国际上已将HPLC法作为酒类糖分含量测定的仲裁法。 　　2.2氨基酸的检测 　　氨基酸是生物体中重要的生命物质，是组成酶和蛋白质的基本单元，准确灵敏地测定食物中氨基酸的含量具有十分重要的意义。目前，柱前衍生化高效液相色谱法以其灵活和易于推广的特点。 　　采用邻苯二甲醛（OPA）-9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC）进行氨基酸柱前衍生，RP-HPLC法测定氨基酸含量。3个不同浓度梯度的氨基酸标准溶液线性关系良好，样品保留时间绝对误差小于0.1min，重现性RSD值低于4%，加标回收率均在90%～110%。 　　2.3脂肪酸的检测 　　脂肪酸是指一端含有一个羧基的长的脂肪族碳氢链，是有机物。饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸和三脂酰苷油磷脂卵磷脂等，对人体的健康起到了重要的作用。用HPLC法与基质辅助激光解吸电离飞行时间技术联用，分析蛋黄中磷脂粗提物。将从蛋黄中提取的多种磷脂通过HPLC预先分离，收集各组分后分别进行MALDI-TOF-MS分析得到比较清晰的质谱图。选用RP-HPLC与电容耦合非接触电导检测（C4D）结合的方法分离测定肉蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸与亚油酸5种未衍生化长链脂肪酸，采用HypersilODSC1