精子功能检测的进展课件.pptVIP

国内学者研究了精子核蛋白成熟度与IVF结局之间的关系，发现精子核蛋白不成熟度与IVF受精率和正常受精率呈负相关性 （r=-0.343、-0.253， P均0.05），与卵裂率、优质胚胎率无相关性（r=-0.04、-0.03， P均0.05） （江莉等,精子核成熟度与体外受精结局的关系,山东医药2012年第52卷第19期）。 有学者对315例自然流产妇女的配偶精子进行核蛋白成熟度检测研究，发现精子核蛋白不成熟是孕早期自发性流产、胚胎停育的男性危险因素，但经药物治疗精子不成熟度得以改善后，可明显减少女方自发流产／胚胎停育率和提高分娩率 。 （刘瑜等,孕早期自发性流产与胚胎停育男性因素病例对照研究,中国男科学杂志2010年第24卷） 精子染色体非整倍体是精子发生过程中减数分裂缺陷造成的细胞染色体数目异常。 荧光原位杂交（FISH）是检测精子染色体非整倍体的主要方法之。 研究表明，不育男性染色体非整倍体的发生率比可育男性高10倍。精液常规检查参数下降也会导致非整倍体精子发生率增加（VegettiW et al., 2000）。 回顾性研究表明，非整倍体精子与非整倍体儿的出生（或妊娠）相关（BlancoJ et al., 1998；Martinez et al., 1999； Carrell DT et al., 2001）。 前瞻性研究表明，非整倍体精子含量高的男性产生非整倍体胚胎、非倍体胎儿或 IVF失败的风险增加（Martin RH et al., 1986； Nagvenkar P et al., 2005； Gianaroli L et al., 2005）。 复发性流产也与非整倍体精子的增加相关（Rubio C et al., 1999）。 细胞凋亡是细胞受遗传机制控制，出现一系列形态功能的改变而自行结束生命的现象，是机体清除那些形态功能异常细胞的重要手段。 根据凋亡的过程可分为早期、中期和晚期凋亡，相应的检测指标有： 1、早期凋亡：细胞膜磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)的翻转和线粒体膜电位去极化（MMP）； 2、中期凋亡：Caspase （天门冬氨酸特异性蛋白酶,CP）酶系统的活化； 3、晚期凋亡：DNA的碎片化（DNA Fragment,DF）。 五、精子与生精细胞凋亡检测 细胞凋亡机制示意图 研究表明，正常生精过程中自发性和受到各种外来因素影响而诱发生精细胞减少大多与凋亡过程有关。（Vigier M et al., 2004;Kilinc F et al., 2004;J Moretti E et al., 2007;Theas MS et al., 2006;Assinder S et al., 2007）。 生精细胞凋亡发生在三个阶段：首先是在A型精原细胞的有丝分裂阶段；其次是精母细胞的减数分裂阶段；最后是精子的形成阶段。 生精细胞凋亡的意义在于维持精子发生过程的动态平衡，维持支持细胞与生精细胞的最佳比例，清除异常生殖细胞，调节生精过程中精子的数量和质量。在病理状态下，生精细胞凋亡则导致少精子或无精子症发生。 （Kilinc F et al., 2004;J Moretti E et al., 2007;Theas MS et al., 2006;Assinder S et al., 2007） 成熟精子的凋亡主要发生在精子离开睾丸后的阶段。诱发精液中精子凋亡的主要因素是活性氧（ROS）损伤。 人精液中的活性氧物质由精子和白细胞产生。 精子内源性的活性氧物质主要来自线粒体分泌的过氧化氢，外源性活性氧物质主要是超氧阴离子。 （Aitken West,1990; Alvarez et al., 1987 ; Iwasaki Gagnon, 1992 ） 现有的研究表明精液中精子凋亡率与精子浓度、精子前向活动率、精子形态呈显著负相关性，而与精子的活率无显著相关性，是少精子症、弱精子症和畸形精子症形成的重要因素（Gandini L et al., 2000; Chen Z et al., 2006;Zhang HB et al., 2008;Lv YiQing et al.,2009） 较高的凋亡指标检测水平已经被证实与精子穿透卵母细胞的能力呈负相关性。与正常能穿透卵母细胞的精子相比，低穿透能力的精子往往含有很高的凋亡率（Grunewald et al., 2008）。 精子凋亡指