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生化反应曲线;
生化分析基本原理
;罗氏生化分析系统产品线;cobas? 8000 模块化组合分析系统 智能、高效、强劲;物质对光吸收的基本定律- Lambert- Beer定律 ;根据Lambert- Beer定律来计算待测物浓度
如若吸光系数 (ε )未知,我们就需要采用定标曲线 来计算待测物的浓度。
; Lambert-Beer 定律
适合于任何均匀非散射的介质
;Roche Hitachi Photometer; 当相应的比色杯每一次通过光路系统时,光路系统会测量并记录下相应的吸光度
光路系统可以测量后分光后12个波长的相应吸光度。
12 有效波长: 340, 376, 415, 450, 480, 505, 546, 570, 600, 660, 700, 800nm
多数检测项目都使用双波长检测方法。(可去除干扰物对检测结果的影响);;;仪器读数的原理;Reaction sequence;;Endpoint and rate (kinetic) assays
;;两点终点法(2-point end)
一点终点法 (1-point end)
一点终点单试剂(1-point endpoint assay – one reagent)
一点终点双试剂(1-point endpoint assay – two reagents)
三点终点法(3-point end)
; 两点终点法;去除了样本的本底
采用两个测量点
针对两个或多个试剂的项目
第一个读数点一般选在添加最后一个试剂之前
第二个读数点一般选在加入最后一个试剂之后且已经达到了反应终点 ;两点终点法的反应曲线–Cobas c702
;两点读数的时间点:
第19点测量包含了样本和试剂1的本底
? sample + reagent 1
第 38点在加入所有试剂后,反应达到终点
? sample + reagent 1+ reagent 2; RF-II C4
C3 ASL
CRPL IGG
IGA IGM; 一点终点法;单试剂一点终点法的特点(1-point endpoint assay – one reagent)
不包含样本的本底
仅进行一个点的测量
检测项目举例:甘油三酯(TG);单试剂一点终点法的反应曲线1-point endpoint assay – one reagents;不包含样本的本底
仅进行一点测量
应用项目举例:
Magnesium
不采用两点终点法主要是样本和R1体积相加仍180uL(最小反应体积,无法测量);
1st entry: 方法类型
2nd entry: 总分析时间
3rd - 6th entry: 测量点 ; TRIGL CHO
;例如,多项同??组合试剂盒,CHO与TG同一测定 ;上升 increasing 或 下降decreasing; 速率法 ;速率A法 (Rate A)
两点速率法(2-point Rate)
; 速率A法;Rate A assay – Modular P;GOT/AST GGT
GPT/ ALT Lipase
ALP GLDH
Amylase LDH
CHE
CKMB
; 2点速率法;2-point Rate assay;采用一种或多种试剂
检测两个测量点检测固定的间隔时间内两点的吸光度变化。
换算成? Abs/min参与计算
在加入最后最后一个试剂之后进行吸光度检测。;2-point Rate assay – Modular P;Ammonia
Acid phosphatase Non-prostatic phosphatase
Urinary/CSF protein Bicarbonate
Urea;Reaction Direction;生化反应曲线;Thank you for your attention
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