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- 2019-09-13 发布于北京
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革兰氏染色和抗酸染色法;革兰染色法
革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家汉斯·克里斯蒂安·革兰 (Hans Christain Gran )创立的。;实验目的和要求;;;细菌对革兰氏染色的不同反应是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。
初染后,所有细菌都被染成初染剂的蓝紫色。
碘作为媒染剂,它能与结晶紫结合成结晶紫—碘的复合物,增强染料与细菌的结合力。;当用脱色剂处理时,G+菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成,壁厚、类脂质含量低,用乙醇脱色时细胞壁脱水,使肽聚糖层的网状结构孔径缩小,透性降低,从而使结晶紫—碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内,经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色。
G-菌则不同,由于其细胞壁肽聚糖层较薄、类脂质含量高,所以当脱色处理时,类脂质被乙醇溶解,细胞壁透性增大,使结晶紫—碘的复合物比较容易被洗脱出来,用复染剂复染后,细胞被染上复染剂的红色。;细胞保留初染剂蓝紫色的细菌为G+菌;
细胞中初染剂被脱色剂洗脱而染上复染剂的颜色(红色)的细菌为G-菌。;二、实验器材
大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,革兰氏染色液,生理盐水,载玻片,接种环,显微镜等。;三、操作步骤; 1、涂片:将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别涂片、干燥、固定。
2、染色:
(1)初染:加草酸铵结晶紫一滴,约一分钟,水洗
(2)媒染:滴加碘
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